Journal of Zhejiang University

Current Issue: <JZUS-B>

Journal of Zhejiang University-SCIENCE B (Biomedicine & Biotechnology)

ISSNs 1673-1581 (Print); 1862-1783 (Online); CN 33-1356/Q; started in 2005,Monthly.

JZUS-B is an international "Biomedicine & Biotechnology" reviewed-Journal indexed by SCI-E, MEDLINE, PMC, BA, BIOSIS Previews, JST, ZR, CA, SA, AJ, ZM, CABI, CSA, etc., and supported by the National Natural Science Foundation of China. It mainly covers research in Biomedicine, Biochemistry and Biotechnology, etc.

Impact factor: 1.099 (2011), 1.108 (2012), 1.293 (2013), 1.278 (2014), 1.303 (2015), 1.676 (2016), 1.815 (2017), 1.879 (2018).

Journal of Zhejiang University SCIENCE B

ISSN 1673-1581(Print), 1862-1783(Online), Monthly

2017 Vol.18 No.12 P.1031-1122

<<< CONTENTS >>>

Articles

Phyllanthus emblica Linn. fruit extract potentiates the anticancer efficacy of mitomycin C and cisplatin and reduces their genotoxicity to normal cells in vitro

Xi-han Guo, Juan Ni, Jing-lun Xue, Xu Wang

DOI: 10.1631/jzus.B1600542 Downloaded: 2532 Clicked: 5023 Cited: 1 Commented: 0(p.1031-1045) <Full Text> <PPT> 1558

Chinese summary <24> 餘甘子提取物(wù)增強絲裂黴素C和順鉑的抗癌作用并降低其對正常細胞的遺傳毒性

目的：評估餘甘子提取物(wù)（PE）對絲裂黴素C（MMC）和順鉑（cDDP）抗癌活性及其遺傳毒性副作用的影響。
創新點：首次發現PE能減弱MMC和cDDP對人正常結腸上皮細胞基因組的損傷以及降低基因組受損細胞的克隆形成能力和克隆異質性。
方法：人結腸癌Colo205細胞和人正常結腸上皮NCM460細胞分(fēn)别經PE、PE+MMC組合或PE+cDDP組合處理72 h。細胞增殖用台盼藍(lán)拒染法和克隆形成法測定，遺傳毒性用胞質分(fēn)裂阻斷微核分(fēn)析法（CBMN）測定。
結論：結果顯示，PE可以顯著增強MMC和cDDP的抗Colo205細胞增殖能力（圖1）。同時，PE顯著降低MMC和cDDP誘導的NCM460細胞基因組不穩定現象，包括降低微核、核質橋和核芽（表1和圖2）以及多核化細胞（圖3）。此外(wài)，PE顯著降低經MMC和cDDP處理的NCM460細胞克隆性擴增能力，并降低克隆的異質性（圖4）。綜上所述，PE不僅能增強MMC和cDDP的抗癌能力，還可能具有減弱它們誘發正常細胞惡性轉變的潛力。

關鍵詞組：餘甘子；絲裂黴素C；順鉑；基因組不穩定；胞質阻斷微核分(fēn)析

Kinesin KIF4A is associated with chemotherapeutic drug resistance by regulating intracellular trafficking of lung resistance-related protein

Li-na Pan, Yuan Zhang, Chang-jun Zhu, Zhi-xiong Dong

DOI: 10.1631/jzus.B1700129 Downloaded: 2147 Clicked: 3923 Cited: 0 Commented: 0(p.1046-1054) <Full Text> <PPT> 1490

Chinese summary <20> 驅動蛋白(bái)KIF4A通過調節肺耐藥相關蛋白(bái)LRP的胞内運輸參與腫瘤耐藥

目的：探讨驅動蛋白(bái)KIF4A調節肺耐藥相關蛋白(bái)LRP在細胞内分(fēn)布的作用機制，及其在腫瘤耐藥過程中(zhōng)的作用。
創新點：首次發現驅動蛋白(bái)KIF4A的C端區與肺耐藥相關蛋白(bái)LRP的N端區結合，且KIF4A調節LRP在胞内分(fēn)布依賴KIF4A的N端馬達結構域。
方法：應用免疫共沉澱和免疫熒光技術檢測KIF4A與LRP的結合。根據KIF4A及LRP蛋白(bái)結構，構建綠色熒光蛋白(bái)（GFP）融合KIF4A截短突變質粒及Flag融合LRP截短突變質粒，免疫沉澱分(fēn)析KIF4A與LRP相互作用區域。通過RNA幹涉（RNAi）内源KIF4A，外(wài)源轉入KIF4A截短突變體(tǐ)質粒，檢測LRP在胞内分(fēn)布。
結論：本實驗中(zhōng)免疫沉澱及免疫熒光結果顯示，KIF4A與LRP結合，且在微管上有共定位（圖1）。截短突變體(tǐ)免疫沉澱實驗結果表明，KIF4A的C端尾部結構域與LRP的N端區結合（圖2），RNAi敲降内源KIF4A表達導緻LRP聚集在細胞核周圍（圖3），外(wài)源表達全長KIF4A可恢複LRP在胞内彌散狀定位，但外(wài)源表達KIF4A的C端或N端截短突變無法恢複LRP的胞内定位，仍聚集在核周區域（圖4）。綜上所述，驅動蛋白(bái)KIF4A可與LRP結合，并調節LRP在胞内定位，KIF4A的C端尾部結構域與LRP結合，N端馬達結構域促進LRP在胞内運輸，二者缺一(yī)不可。

關鍵詞組：驅動蛋白(bái)（KIF4A）；肺耐藥相關蛋白(bái)（LRP）；耐藥

Comparison of the characteristics of macrophages derived from murine spleen, peritoneal cavity, and bone marrow

Yan-long Zhao, Pu-xun Tian, Feng Han, Jin Zheng, Xin-xin Xia, Wu-jun Xue, Xiao-ming Ding, Chen-guang Ding

DOI: 10.1631/jzus.B1700003 Downloaded: 3062 Clicked: 4563 Cited: 0 Commented: 0(p.1055-1063) <Full Text> <PPT> 1606

Chinese summary <19> 小(xiǎo)鼠脾髒、腹腔和骨髓源性巨噬細胞特征比較

目的：對比分(fēn)析脾髒、腹腔和骨髓源性巨噬細胞（SPMs、PCMs和BMs）在安靜及極化狀态下(xià)的差異。
創新點：首次對比分(fēn)析脾髒、腹腔和骨髓源性巨噬細胞在安靜（M0）及極化狀态（M1和M2）下(xià)的特征。
方法：通過小(xiǎo)鼠脾髒研磨及單細胞貼壁獲得脾源性巨噬細胞；腹腔灌洗及細胞貼壁獲得腹腔源性巨噬細胞；骨髓貼壁細胞在巨噬細胞集落刺激因子體(tǐ)外(wài)刺激下(xià)培養7天獲得骨髓源性巨噬細胞。三種細胞即爲M0型巨噬細胞，M0在幹擾素及脂多糖刺激下(xià)獲得M1型巨噬細胞，M0在白(bái)介素4（IL-4）刺激下(xià)獲得M2型巨噬細胞。通過流式細胞儀分(fēn)析三種類型巨噬細胞在三種狀态下(xià)的II類主要組織相容性複合體(tǐ)（MHC II）和CD86表達差異。通過實時熒光定量聚合酶鏈式反應（qPCR）檢測腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白(bái)介素1β（IL-1β）、甘露糖受體(tǐ)（MR）和類幾丁質酶3樣分(fēn)子（Ym1）的表達變化。
結論：骨髓貼壁細胞培養能獲得最大(dà)量的同源巨噬細胞（圖1和2），但表型偏向于M2型巨噬細胞（圖3和4）。三種巨噬細胞均能極化爲M1和M2型巨噬細胞（圖5），其中(zhōng)SPMs具有更強的M1型極化能力，而M2型極化能力之間未見明顯差異（圖6）。綜上所述，三種細胞無論在安靜及極化狀态下(xià)均具有不同的特征，骨髓可以獲得大(dà)量同源性巨噬細胞，但性質不同于組織源性的脾髒和腹腔巨噬細胞。

關鍵詞組：巨噬細胞；脾髒；腹腔；骨髓

Polymorphisms of the IGF1 gene and their association with growth traits, serum concentration and expression rate of IGF1 and IGF1R in buffalo

Mohammed A. El-Magd, Ayman A. Saleh, Abeer A. Nafeaa, Shymaa M. El-Komy, Mohamed A. Afifi

DOI: 10.1631/jzus.B1600573 Downloaded: 2737 Clicked: 5569 Cited: 0 Commented: 0(p.1064-1074) <Full Text> <PPT> 1681

Chinese summary <22> 水牛IGF1基因多态性與其生(shēng)長性狀、血清濃度以及IGF1和IGF1R基因表達的相關性研究

目的：探讨胰島素樣生(shēng)長因子1（insulin-like growth factor 1，IGF1）基因單核苷酸多态性（SNP）與埃及水牛生(shēng)長性狀的關聯性。
創新點：發現IGF1基因多态性對埃及水牛的生(shēng)長性狀、血液生(shēng)化指标和基因表達有顯著影響，并爲埃及水牛的選育提供重要的分(fēn)子遺傳标記。
方法：以200頭埃及水牛爲試驗對象，對其IGF1基因的多态性進行檢測，并分(fēn)析其與生(shēng)長性狀、血液生(shēng)理生(shēng)化指标和基因表達的相關性。
結論：在水牛IGF1基因多态性分(fēn)析中(zhōng)，發現兩個新的SNP位點（G64A和G280A）分(fēn)别分(fēn)布在外(wài)顯子1和外(wài)顯子4的非編碼區。不同基因型的統計分(fēn)析表明，G64A和G280A位點的GG基因型水牛個體(tǐ)分(fēn)别在3~6月齡和6~9月齡的體(tǐ)重（BW）和平均日增重（ADG）均顯著高于其他基因型（P<0.05）。這兩個SNPs位點的組合基因型産生(shēng)了三種單倍體(tǐ)GG/GG、AG/AG和AA/AA。在3~12月齡的水牛個體(tǐ)中(zhōng)，單倍體(tǐ)基因型與BW和ADG存在顯著關聯（P<0.0001）。純合的GG/GG單倍體(tǐ)基因型水牛生(shēng)長性能優于其他水牛。兩個SNP位點與半腱肌中(zhōng)IGF1和IGF1R的mRNA水平以及IGF1血清濃度水平相關。此外(wài)，GG/GG單倍體(tǐ)水牛表現出較高的mRNA和血清濃度水平。綜上所述，這兩種SNP位點G64A和G280A可作爲埃及水牛生(shēng)長性狀選育的重要分(fēn)子遺傳标記。

關鍵詞組：胰島素樣生(shēng)長因子1（IGF1）；胰島素樣生(shēng)長因子1受體(tǐ)（IGF1R）；單核苷酸多态性（SNP）；生(shēng)長性狀；水牛

Monoclonal antibody-based serological assays for detection of Potato virus S in potato plants

Ge Song, Jia-yu Wu, Yan Xie, Yong Liu, Ya-juan Qian, Xue-ping Zhou, Jian-xiang Wu

DOI: 10.1631/jzus.B1600561 Downloaded: 2395 Clicked: 4464 Cited: 0 Commented: 0(p.1075-1082) <Full Text> <PPT> 1609

Chinese summary <19> 基于單克隆抗體(tǐ)的檢測馬鈴薯植物(wù)中(zhōng)馬鈴薯S病毒的血清學方法

目的：建立基于單克隆抗體(tǐ)的檢測馬鈴薯植物(wù)中(zhōng)馬鈴薯S病毒（PVS）的血清學方法，爲我(wǒ)國PVS的田間調查和檢測及無毒種薯的生(shēng)産提供快速、實用的檢測技術。
創新點：首次制備了抗PVS的高度特異和靈敏的單克隆抗體(tǐ)，并以制備單抗爲核心建立三種能快速、準确、靈敏、特異地檢測PVS的血清學檢測方法。
方法：以差速離(lí)心方法提純的PVS病毒粒子作爲免疫原免疫BALB/c小(xiǎo)鼠，通過雜(zá)交瘤技術獲得了能穩定傳代并分(fēn)泌PVS單克隆抗體(tǐ)的雜(zá)交瘤細胞株；擴繁的雜(zá)交瘤細胞注射到小(xiǎo)鼠腹腔獲得單抗腹水，并以純化的制備單抗爲核心，根據血清學原理建立檢測馬鈴薯植物(wù)中(zhōng)PVS的雙抗夾心酶聯免疫吸附試驗（DAS-ELISA）、斑點酶聯免疫吸附試驗（dot-ELISA）和組織印迹酶聯免疫吸附試驗（tissue print-ELISA）血清學檢測方法；并對田間馬鈴薯樣品進行PVS檢測，分(fēn)析建立的血清學方法檢測PVS的有效性。
結論：利用雜(zá)交瘤技術獲得了五株能穩定傳代并分(fēn)泌PVS單克隆抗體(tǐ)的雜(zá)交瘤細胞株，以制備雜(zá)交瘤細胞分(fēn)泌的單抗爲核心建立了檢測馬鈴薯植株中(zhōng)PVS的DAS-ELISA、dot-ELISA和tissue print-ELISA三種血清學方法。三種血清學方法檢測感染PVS的馬鈴薯植株呈陽性反應，而檢測健康的馬鈴薯及感染其他三種馬鈴薯病毒的植株呈陰性反應，且建立的DAS-ELISA和dot-ELISA方法檢測馬鈴薯病葉的靈敏度分(fēn)别達到1:163 840和1:10 240倍稀釋（w/v，g/ml）。田間樣品檢測結果發現，建立的血清學方法的檢測結果與逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）的檢測結果一(yī)緻，表明建立的血清學方法可有效地用于馬鈴薯植物(wù)中(zhōng)PVS的檢測，從而爲我(wǒ)國PVS的田間調查和檢測及無毒種薯的生(shēng)産提供快速、實用的檢測技術。

關鍵詞組：馬鈴薯S病毒；Tissue print-ELISA；Dot-ELISA；DAS-ELISA

Effects of dietary fresh fermented soybean meal on growth performance, ammonia and particulate matter emissions, and nitrogen excretion in nursery piglets

Sai-sai Cheng, Yuan Li, Shi-jie Geng, Luan-sha Hu, Xiong-feng Fu, Xin-yan Han

DOI: 10.1631/jzus.B1700180 Downloaded: 2091 Clicked: 4691 Cited: 0 Commented: 0(p.1083-1092) <Full Text> <PPT> 1579

Chinese summary <22> 日糧中(zhōng)新鮮發酵豆粕對保育豬生(shēng)長性能、氨氣和顆粒物(wù)排放(fàng)以及氮排洩的影響

目的：評估日糧中(zhōng)新鮮發酵豆粕對仔豬生(shēng)長的促進作用及對畜舍空氣質量的改善作用。
創新點：首次證實新鮮發酵豆粕的使用可提高仔豬對日糧氮的利用，降低氮排洩以及降低畜舍氨氣和顆粒物(wù)濃度。
方法：選擇日齡相近的472頭保育仔豬（長×大(dà)二元雜(zá)交，體(tǐ)重(16.3±0.36) kg），随機分(fēn)爲兩組，每組236頭。對照組飼喂不添加新鮮發酵豆粕的基礎日糧，試驗組飼喂添加10%新鮮發酵豆粕的日糧（FSM組），兩組日糧的粗蛋白(bái)含量一(yī)緻。試驗期28天，試驗期間監測畜舍氨氣和顆粒物(wù)濃度（圖1和2），試驗結束采樣進行化學檢測。
結論：與對照組相比，FSM組的平均日增重顯著提高（P<0.05）。在整個實驗過程中(zhōng)，與對照組相比，FSM組豬舍中(zhōng)NH3濃度下(xià)降了19.0%（P<0.05），顆粒物(wù)（PM₁₀和PM_2.5）濃度分(fēn)别下(xià)降了19.9%（P<0.05）和11.6%（P<0.05）。FSM組糞便中(zhōng)氨态氮和亞硝酸鹽含量分(fēn)别增加了32.9%（P<0.05）和28.4%（P <0.05）。與對照組相比，FSM組糞便pH值明顯下(xià)降（P<0.05）。試驗結束時，FSM組的總蛋白(bái)濃度顯著增加（P<0.05），血清尿素氮（BUN）濃度降低（P<0.05）。結果表明，日糧中(zhōng)新鮮發酵豆粕不僅提高了保育豬的生(shēng)長性能，而且減少了糞便中(zhōng)氮向NH3的轉化，降低了畜舍中(zhōng)PM₁₀和PM_2.5的濃度。

關鍵詞組：新鮮發酵豆粕；氨氣；顆粒物(wù)；氮轉化；保育豬

Effects of glucose and gibberellic acid on glucosinolate content and antioxidant properties of Chinese kale sprouts

Hui-ying Miao, Meng-yu Wang, Jia-qi Chang, Han Tao, Bo Sun, Qiao-mei Wang

DOI: 10.1631/jzus.B1700308 Downloaded: 1913 Clicked: 4439 Cited: 0 Commented: 0(p.1093-1100) <Full Text> <PPT> 1490

Chinese summary <21> 葡萄糖和赤黴酸對芥藍(lán)芽菜中(zhōng)芥子油苷含量及其抗氧化能力的影響

目的：探究外(wài)源施加葡萄糖和赤黴酸對芥藍(lán)芽菜中(zhōng)芥子油苷的積累，花青素、多酚和維生(shēng)素C等抗氧化物(wù)的含量，以及總抗氧化活性的影響。
創新點：首次發現葡萄糖和赤黴酸可以協同促進芥藍(lán)芽菜中(zhōng)幾乎所有種類芥子油苷以及總芥子油苷的積累，并且可以大(dà)幅度提升總多酚的含量以及抗氧化能力。
方法：以芥藍(lán)芽菜爲材料，使用3%（0.03 g/ml）葡萄糖和5 µmo/L赤黴酸進行外(wài)源處理，以水處理作爲對照組。用高效液相色譜法分(fēn)析芥子油苷和維生(shēng)素C的含量；采用分(fēn)光光度法檢測花青素的含量；用Folin-Ciocalteu試劑法測定總多酚的含量；利用亞鐵還原能力實驗（FRAP）法進行總抗氧化能力的評估。
結論：葡萄糖和赤黴酸共同處理可以有效提升芥藍(lán)芽菜中(zhōng)有益健康的植物(wù)化學物(wù)質含量以及抗氧化能力。

關鍵詞組：芥子油苷；抗氧化物(wù)；葡萄糖；赤黴酸；芥藍(lán)芽菜

Apoptosis induction of colorectal cancer cells HTL-9 in vitro by the transformed products of soybean isoflavones by Ganoderma lucidum

Mei-lin Cui, Huan-yi Yang, Guo-qing He

DOI: 10.1631/jzus.B1700189 Downloaded: 2202 Clicked: 4372 Cited: 0 Commented: 0(p.1101-1112) <Full Text> <PPT> 1690

Chinese summary <20> 靈芝菌生(shēng)物(wù)轉化大(dà)豆異黃酮及其産物(wù)對結直腸癌細胞HTL-9的體(tǐ)外(wài)凋亡誘導研究

目的：通過靈芝菌生(shēng)物(wù)轉化大(dà)豆異黃酮，得到富含苷元及靈芝活性成分(fēn)的多因子轉化産物(wù)，并研究了轉化産物(wù)對結直腸癌細胞HTL-9的體(tǐ)外(wài)凋亡誘導，初步探讨轉化産物(wù)的抗癌活性及機理。
創新點：靈芝是一(yī)種珍貴的藥用真菌，大(dà)豆異黃酮的苷元物(wù)質也具有重要的藥理活性，本文首次利用靈芝菌液體(tǐ)發酵的勻漿液生(shēng)物(wù)轉化大(dà)豆異黃酮，所得到的産物(wù)中(zhōng)大(dà)豆苷元與染料木素轉化率高，同時還富集了靈芝菌的活性成分(fēn)，并對轉化産物(wù)的抗癌活性及機理進行了初步探讨。
方法：首先利用靈芝菌液體(tǐ)發酵的勻漿體(tǐ)系生(shēng)物(wù)轉化大(dà)豆異黃酮（圖1）。其次，對轉化産物(wù)的抗癌活性進行研究，主要包括對癌細胞存活率（圖2）、細胞凋亡（圖3）及細胞周期分(fēn)布（圖4）的影響。最後，利用蛋白(bái)質印迹（Western-blot）與逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）技術對凋亡相關的基因和蛋白(bái)進行檢測（圖5和表2），初步探讨轉化産物(wù)的體(tǐ)外(wài)抗癌機理。
結論：本實驗結果顯示，轉化産物(wù)中(zhōng)大(dà)豆苷元及染料木素的轉化率分(fēn)别爲96.63%和87.82%，其中(zhōng)染料木素的含量可達(703.21±4.35) mg/g，同時轉化産物(wù)中(zhōng)還富含了靈芝菌的活性成分(fēn)。其次，對轉化産物(wù)抗癌活性研究發現，其能有效降低HTL-9細胞的存活率，可通過将細胞阻滞于G1期而誘導細胞晚期凋亡。此外(wài)，轉化産物(wù)（100 µg/ml）還可明顯上調Bax、Caspase-3、Caspase-8、Cyto-c和p53的表達量，而Survivin和NF-κB表達量發生(shēng)明顯下(xià)調。結果表明，轉化産物(wù)主要通過線粒體(tǐ)途徑誘導細胞凋亡，但同時還調控多個與凋亡相關的基因。

關鍵詞組：大(dà)豆異黃酮；靈芝；轉化；抗增殖活性；凋亡

Efficacy of amiodarone and lidocaine for preventing ventricular fibrillation after aortic cross-clamp release in open heart surgery: a meta-analysis of randomized controlled trials

Yong Zheng, Qiang Gu, Hong-Wu Chen, Huai-Ming Peng, Dong-Yu Jia, Yu Zhou, Mei-Xiang Xiang

DOI: 10.1631/jzus.B1700229 Downloaded: 1932 Clicked: 4355 Cited: 0 Commented: 0(p.1113-1122) <Full Text> <PPT> 1529

Chinese summary <21> 胺碘酮和利多卡因對開(kāi)胸心髒手術中(zhōng)再灌注性室顫預防效果的随機對照試驗荟萃分(fēn)析

目的：系統評估胺碘酮、利多卡因或安慰劑對心髒手術中(zhōng)主動脈結紮松解（ACC）後再灌注性室顫（VF）發生(shēng)的影響。
創新點：胺碘酮、利多卡因對于預防ACC後再灌注VF的效果，目前相關的随機對照試驗（RCTs）并無統一(yī)的結論，本研究綜合之前RCTs進行荟萃分(fēn)析。
方法：遵循PRISMA和Cochrane系統評估手冊對PubMed、EMBASE及Cochrane進行文獻檢索（圖1），荟萃分(fēn)析符合要求的RCTs。
結論：當前的證據表明胺碘酮和利多卡因在開(kāi)胸心髒手術中(zhōng)預防再灌注VF的效果兩者之間并無顯著差異，但均明顯優于安慰劑；在随後需要電除顫的患者的比例上，胺碘酮、利多卡因及安慰劑三者間無統計學差異。

關鍵詞組：胺碘酮；利多卡因；再灌注室顫；心髒手術