Journal of Zhejiang University

Current Issue: <JZUS-B>

Journal of Zhejiang University-SCIENCE B (Biomedicine & Biotechnology)

ISSNs 1673-1581 (Print); 1862-1783 (Online); CN 33-1356/Q; started in 2005,Monthly.

JZUS-B is an international "Biomedicine & Biotechnology" reviewed-Journal indexed by SCI-E, MEDLINE, PMC, BA, BIOSIS Previews, JST, ZR, CA, SA, AJ, ZM, CABI, CSA, etc., and supported by the National Natural Science Foundation of China. It mainly covers research in Biomedicine, Biochemistry and Biotechnology, etc.

Impact factor: 1.099 (2011), 1.108 (2012), 1.293 (2013), 1.278 (2014), 1.303 (2015), 1.676 (2016), 1.815 (2017), 1.879 (2018).

Journal of Zhejiang University SCIENCE B

ISSN 1673-1581(Print), 1862-1783(Online), Monthly

2017 Vol.18 No.9 P.737-832

<<< CONTENTS >>>

Review

Review: Mesenchymal stem cells as therapeutic agents and in gene delivery for the treatment of glioma

Bing-yu Xiang, Lu Chen, Xiao-jun Wang, Charlie Xiang

DOI: 10.1631/jzus.B1600337 Downloaded: 2379 Clicked: 4032 Cited: 0 Commented: 0(p.737-746) <Full Text> <PPT> 1558

Chinese summary <21> 間充質幹細胞在膠質瘤治療中(zhōng)的作用研究

概要：膠質瘤是顱内發病率最高的惡性腫瘤，雖然臨床上可以用"手術+化療"的方法進行治療，但由于其浸潤性，對化療藥物(wù)的低敏感性等原因，常在治療後複發，嚴重威脅人類生(shēng)命健康。間充質幹細胞（MSC）是幹細胞中(zhōng)的一(yī)員(yuán)，具有增殖能力強、分(fēn)化潛能大(dà)、免疫原性低及采集方便等優點，其趨化性更使MSC成爲腫瘤治療的一(yī)個理想工(gōng)具。本文對幹細胞治療膠質瘤的研究現狀進行了歸納總結，着重闡述了MSC的旁分(fēn)泌途徑作用及作爲基因載體(tǐ)導入腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(tǐ)（TRAIL）、溶瘤病毒等其他治療基因的生(shēng)物(wù)功能，以期對進一(yī)步的治療研究提供幫助。

關鍵詞組：癌症；間充質幹細胞；膠質瘤；細胞治療

Articles

Global changes of 5-hydroxymethylcytosine and 5-methylcytosine from normal to tumor tissues are associated with carcinogenesis and prognosis in colorectal cancer

Yi-ping Tian, Ai-fen Lin, Mei-fu Gan, Hao Wang, Dan Yu, Chong Lai, Dan-dan Zhang, Yi-min Zhu, Mao-de Lai

DOI: 10.1631/jzus.B1600314 Downloaded: 2447 Clicked: 4168 Cited: 0 Commented: 0(p.747-756) <Full Text> <PPT> 1675

Chinese summary <24> 正常組織與腫瘤組織中(zhōng)總體(tǐ)5hmC和5mC水平的變化程度與結直腸癌腫瘤發生(shēng)及預後有關

目的：研究DNA總體(tǐ)甲基化、羟甲基化水平與結直腸癌發生(shēng)、發展及預後的關系。
創新點：采用腫瘤與正常組織總體(tǐ)5-甲基胞嘧啶（5mC）、5-羟甲基胞嘧啶（5hmC）的比值并探讨其與結直腸癌臨床病理變化和預後的關系。
方法：采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）方法檢測腫瘤與相應正常組織基因組中(zhōng)總體(tǐ)5hmC和5mC水平。
結論：C/N-5mC比值的水平對結直腸癌的預後是一(yī)個獨立的保護性因子（P=0.04）。當病人同時具有高水平的C/N-5hmC和低水平的C/N-5mC，其預後更差（P<0.01）。因此，可以使用5mC和5hmC對結直腸癌的發生(shēng)和預後進行評估。

關鍵詞組：5-羟甲基胞嘧啶；5-甲基胞嘧啶；預後；結直腸癌

Toxicity comparison of different active fractions extracted from radix Sophorae tonkinensis in zebrafish

Hong-cui Liu, Xiao-yu Zhu, Jiang-hua Chen, Sheng-ya Guo, Chun-qi Li, Zhong-ping Deng

DOI: 10.1631/jzus.B1600158 Downloaded: 2447 Clicked: 4478 Cited: 0 Commented: 0(p.757-769) <Full Text> <PPT> 1513

Chinese summary <24> 使用斑馬魚模型比較山豆根不同有效部位的毒性

目的：利用斑馬魚模型評價和比較山豆根不同提取方法提取的有效部位的體(tǐ)内毒性。
創新點：首次在斑馬魚模型中(zhōng)證明山豆根提取方法不同，有效部位的毒性有明顯差異。研究結果有助于指導山豆根的新藥開(kāi)發與臨床應用。
方法：用五種不同的溶劑（去(qù)堿水、乙醇、正丁基乙醇、二氯甲烷和乙醚）提取山豆根，然後通過高效液相色譜法（HPLC）檢測有效部位，将AB品系斑馬魚分(fēn)爲對照組（養魚水處理）和實驗組（山豆根提取物(wù)）。實驗組根據采用的提取溶劑不同，分(fēn)爲以下(xià)六組：去(qù)堿水提取組、乙醇沉提取組、正丁基乙醇提取組、二氯甲烷提取組和乙醚提取組以及山豆根總組分(fēn)組（對照），觀察各種山豆根提取物(wù)對斑馬魚的急性毒性與毒性靶器官。
結論：山豆根乙醚提取組誘發斑馬魚心血管毒性（圖1）；山豆根去(qù)堿水提取組、乙醇沉提取組以及山豆根總組分(fēn)組誘發斑馬魚肝髒毒性（圖3和圖4）；而山豆根正丁基乙醇提取組和二氯甲烷提取組誘發斑馬魚心血管毒性（圖1和圖2）和肝髒毒性（圖3和圖4）。

關鍵詞組：山豆根；有效部位；肝髒毒性；心血管毒性；斑馬魚

Protective effect of dihydropteridine reductase against oxidative stress is abolished with A278C mutation

Yan-ting Gu, Yan-chun Wang, Hao-jun Zhang, Ting-ting Zhao, Si-fan Sun, Hua Wang, Bin Zhu, Ping Li

DOI: 10.1631/jzus.B1600123 Downloaded: 2333 Clicked: 4291 Cited: 0 Commented: 0(p.770-777) <Full Text> <PPT> 1628

Chinese summary <20> A278C位點突變減弱了二氫生(shēng)物(wù)蝶呤還原酶的抗氧化作用

目的：評估二氫生(shēng)物(wù)蝶呤還原酶（QDPR）的抗氧化作用，并初步探讨QDPR基因A278C位點突變對其抗氧化作用的影響。
創新點：首次在體(tǐ)外(wài)實驗中(zhōng)發現QDPR有抗氧化作用，且此作用在A278C位點突變後減弱。
方法：我(wǒ)們構建了野生(shēng)型和突變型QDPR質粒，且分(fēn)别轉染至人胚腎293細胞中(zhōng)（HEK293T）。實驗可分(fēn)爲以下(xià)三組：空白(bái)質粒對照組、野生(shēng)型QDPR組和突變型QDPR組。三天後收集細胞觀察活性氧（ROS）和四氫生(shēng)物(wù)蝶呤（BH4）的表達量，使用免疫印迹的方法檢測煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4（NOX4）、谷胱甘肽過氧化物(wù)酶3（GPX3）和超氧化物(wù)歧化酶1（SOD1）的蛋白(bái)表達水平。用半定量逆轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）方法分(fēn)析神經型一(yī)氧化氮合成酶（nNOS）基因的表達。用酶聯免疫吸附測定（ELISA）試劑盒檢測轉化生(shēng)長因子-β1（TGF-β1）的活性。
結論：本實驗中(zhōng)野生(shēng)型QDPR可以顯著降低nNOS、NOX4和TGF-β1的水平，同時提高SOD1和GPX3表達。但當QDPR發生(shēng)位點突變後沒有觀察到上述現象，并且突變型會導緻ROS過量産生(shēng)。我(wǒ)們的數據還表明，野生(shēng)型和突變型QDPR對BH4含量的影響無顯著差異。綜上所述，QDPR有抗氧化作用，但A278C位點突變後會影響QDPR的抗氧化功能。

關鍵詞組：二氫生(shēng)物(wù)蝶呤還原酶（QDPR）；轉化生(shēng)長因子-β1（TGF-β1）；煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4（NOX4）；超氧化物(wù)歧化酶1（SOD1）；谷胱甘肽過氧化物(wù)酶3（GPX3）；氧化應激

Adhesion of bone marrow mesenchymal stem cells on porous titanium surfaces with strontium-doped hydroxyapatite coating

Dan-li Fu, Qiao-hong Jiang, Fu-ming He, Bai-ping Fu

DOI: 10.1631/jzus.B1600517 Downloaded: 2473 Clicked: 4768 Cited: 0 Commented: 0(p.778-788) <Full Text> <PPT> 1674

Chinese summary <18> 多孔純钛表面摻锶羟基磷灰石塗層對骨髓間充質幹細胞粘附的影響

目的：觀察電化學沉積的納米結構摻锶羟基磷灰石塗層表面對大(dà)鼠骨髓間充質幹細胞早期粘附行爲的影響。
創新點：首次觀察電化學沉積的摻锶羟基磷灰石塗層表面骨髓間充質幹細胞的早期粘附行爲，并對相關基因進行了檢測。
方法：純钛表面經過噴砂和雙重酸處理，形成多孔粗糙結構。用電化學方法在其粗糙表面沉積羟基磷灰石塗層（HA）和摻锶羟基磷灰石塗層（Sr-HA）。用貼壁法将4周大(dà)鼠股骨骨髓間充質幹細胞分(fēn)離(lí)進行原代培養後将細胞接種到多孔純钛，HA和Sr-HA表面培養1、6和24小(xiǎo)時。用場發射掃描電鏡（SEM）觀察細胞的形貌特點。用異硫氰酸熒光素（FITC）标記的鬼筆環肽進行免疫熒光染色标記細胞骨架，Hoechst 33258進行細胞核染色，激光共聚焦熒光顯微鏡進行拍照後使用ImageJ進行細胞的計數和圖形分(fēn)析。用實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈式反應（RT-qPCR）測定24、48和72小(xiǎo)時不同實驗組中(zhōng)骨髓間充質幹細胞中(zhōng)FAK、vinculin、integrin β1和integrin β3的基因表達，并進行統計學分(fēn)析。
結論：SEM觀察結果顯示，骨髓間充質幹細胞在三種表面都能正常黏附、生(shēng)長和增殖。在Sr-HA組表面，細胞粘附、細胞活力和細胞骨架的鋪展都較粗糙表面組和HA組有較顯著的提高。RT-qPCR結果顯示，在各個時間點Sr-HA組表面骨髓間充質幹細胞的FAK、vinculin、integrin β1和integrin β3的基因表達與粗糙組有顯著性差異，且在24小(xiǎo)時後與HA組亦有顯著性差異。綜上所述，摻锶羟基磷灰石納米塗層具有較好的生(shēng)物(wù)相容性，可以促進大(dà)鼠骨髓間充質幹細胞在純钛表面的早期粘附。

關鍵詞組：細胞粘附；骨髓間充質幹細胞；摻锶羟基磷灰石；钛

Neuroprotection of dexmedetomidine against propofol-induced neuroapoptosis partly mediated by PI3K/Akt pathway in hippocampal neurons of fetal rat

Ning Zhang, Quan-ping Su, Wei-xia Zhang, Nian-jun Shi, Hao Zhang, Ling-ping Wang, Zhong-kai Liu, Ke-zhong Li

DOI: 10.1631/jzus.B1600476 Downloaded: 2237 Clicked: 4016 Cited: 0 Commented: 0(p.789-796) <Full Text> <PPT> 1552

Chinese summary <22> PI3K/Akt信号通路部分(fēn)參與了右美托咪定對異丙酚誘導的胎鼠海馬神經元凋亡的保護作用

目的：研究PI3K/Akt信号通路是否參與了右美托咪定對異丙酚誘導的胎鼠海馬神經元凋亡的保護作用，并初步探讨可能的作用機制。
創新點：首次利用胎鼠海馬神經元研究發現右美托咪定對異丙酚誘導的神經元凋亡作用部分(fēn)是由PI3K/Akt信号通路介導的。
方法：首先分(fēn)離(lí)胎鼠海馬神經元并鑒定。使用MTT法檢測異丙酚對神經元活性的影響。然後将神經元分(fēn)爲不同的組，分(fēn)别用0.1、1、10和100 µmol/L右美托咪定預處理細胞，然後加入100 µmol/L的異丙酚繼續培養，同時設異丙酚組和正常對照組。使用蛋白(bái)質印迹（Western blot）方法檢測Akt、p-Akt、Bad、p-Bad和Bcl-xL的表達變化。在100 µmol/L右美托咪定預處理前加入LY294002，進一(yī)步研究PI3K/Akt途徑是否參與了右美托咪定對異丙酚誘導的胎鼠海馬神經元凋亡的保護作用。
結論：實驗結果顯示，異丙酚明顯降低了神經元的細胞活性及p-Akt和p-Bad的表達水平，增加了Bad的表達，從而Bcl-xL/Bad的比率升高。100 µmol/L右美托咪定預處理可以逆轉這種效果。LY294002可以抑制右美托咪定的保護作用，說明右美托咪定對異丙酚誘導的胎鼠海馬神經元凋亡的保護作用部分(fēn)是由PI3K/Akt信号通路介導的。

關鍵詞組：右美托咪定；異丙酚；神經凋亡；PI3K/Akt

Antioxidant activity of alcohol aqueous extracts of Crypthecodinium cohnii and Schizochytrium sp.

Jin-hui Yu, Yu Wang, Jie Sun, Fei Bian, Gao Chen, Yan Zhang, Yu-ping Bi, Ying-jie Wu

DOI: 10.1631/jzus.B1600367 Downloaded: 3493 Clicked: 5320 Cited: 0 Commented: 1(p.797-806) <Full Text> <PPT> 1694

Chinese summary <19> 隐甲藻和裂殖壺藻醇水提物(wù)不同極性萃取物(wù)的抗氧化活性研究

目的：評價隐甲藻和裂殖壺藻醇水提物(wù)的石油醚萃取相、乙酸乙酯萃取相、正丁醇萃取相和水相的抗氧化活性水平，爲綜合利用兩種微藻提供理論依據。
創新點：隐甲藻和裂殖壺藻是二十二碳六烯酸（DHA）的重要原料，然而提取DHA後剩餘的藻渣未得到充分(fēn)利用。本文首次對兩種微藻的極性提取物(wù)的不同極性部位進行抗氧化活性評價，并初步确定多酚類化合物(wù)是其發揮抗氧化作用的主要物(wù)質成分(fēn)，爲綜合利用兩種微藻提供了理論依據和參考。
方法：用70%乙醇浸提隐甲藻和裂殖壺藻藻粉，所得粗提物(wù)分(fēn)别使用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水依次萃取，得到不同極性組分(fēn)萃取物(wù)。采用總抗氧化能力、2,2-二苯基-1-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除能力、亞鐵離(lí)子螯合能力及總還原力等方法對不同極性組分(fēn)的萃取物(wù)進行抗氧化活性評價。采用Folin-Ciocalteu方法測定樣品中(zhōng)總多酚含量，采用分(fēn)光光度法測定樣品中(zhōng)總黃酮含量。
結論：本實驗結果顯示，隐甲藻和裂殖壺藻醇水提物(wù)的不同極性組分(fēn)具有較好的抗氧化作用（圖2~5）。相關性分(fēn)析結果表明萃取物(wù)中(zhōng)的多酚類化合物(wù)與其抗氧化水平顯著相關（表2和表3），因此，我(wǒ)們推測多酚類化合物(wù)是兩種微藻的主要抗氧化成分(fēn)。綜上所述，隐甲藻和裂殖壺藻具有綜合開(kāi)發利用潛力，可深入研究。

關鍵詞組：隐甲藻；裂殖壺藻；醇水提物(wù)；抗氧化；總多酚含量

Application of a chitosan coating as a carrier for natamycin to maintain the storage quality of ground cherry (Physalis pubescens L.)

Xiao-lei Hao, Jiao-jiao Zhang, Xi-hong Li, Wei Wang

DOI: 10.1631/jzus.B1600295 Downloaded: 2297 Clicked: 3579 Cited: 0 Commented: 0(p.807-815) <Full Text> <PPT> 1521

Chinese summary <19> 殼聚糖和那他黴素聯合應用對毛酸漿貯藏品質的影響

目的：通過殼聚糖和那他黴素在果蔬生(shēng)理代謝和緻病微生(shēng)物(wù)抑制等方面的特點，達到減緩毛酸漿果實在貯藏期間的生(shēng)理衰老和抑制緻病菌發展，進而提高毛酸漿貯藏品質。
創新點：殼聚糖作爲一(yī)種塗被劑，可以均勻地分(fēn)布在果蔬表面。許多學者在研究中(zhōng)發現殼聚糖可以延緩果蔬的生(shēng)理代謝。那他黴素作爲一(yī)種真菌抑制劑，通常和塗被劑聯合用于奶酪的貯藏防黴。本文的創新在于殼聚糖和那他黴素聯合在毛酸漿貯藏中(zhōng)的應用。
方法：按比例制備出殼聚糖水溶液，随後定量添加那他黴素并攪拌均勻。毛酸漿果實在浸泡一(yī)定時間後，撈出瀝幹。随後按照實驗設計進行分(fēn)組處理。在貯藏期内，定期測定菌落總數對數值、果實外(wài)部色差、超氧化物(wù)歧化酶（SOD）和抗壞血酸過氧化物(wù)酶（APX）酶活性、丙二醛（MAD）含量及感官評價等指标。最後進行總結分(fēn)析。
結論：單獨使用殼聚糖時，可以延緩毛酸漿果實的生(shēng)理衰老，但是難以抑制貯藏期間的緻病微生(shēng)物(wù)（主要是真菌類）；作爲一(yī)種真菌抑制劑，那他黴素具有水溶性低的特點，難以單獨使用。那他黴素與殼聚糖聯合使用時，殼聚糖即可對毛酸漿果實起到生(shēng)理作用，還可以作爲那他黴素的載體(tǐ)，使其均勻分(fēn)布在果實表面。二者聯合使用既能延緩毛酸漿果實的生(shēng)理衰老，又(yòu)能抑制貯藏期間的緻病菌，從而達到提高毛酸漿貯藏品質的目的。

關鍵詞組：殼聚糖；那他黴素；貯藏品質；毛酸漿

Antimelanogenic effects of Inula britannica flower petal extract fermented by Lactobacillus plantarum KCCM 11613P

Eun-hye Park, Won-young Bae, Jae-yeon Kim, Kee-tae Kim, Hyun-dong Paik

DOI: 10.1631/jzus.B1600234 Downloaded: 2163 Clicked: 4193 Cited: 0 Commented: 0(p.816-824) <Full Text> <PPT> 1402

Chinese summary <20> 植物(wù)乳杆菌KCCM 11613P發酵的旋覆花花瓣提取物(wù)的抗黑素生(shēng)成的作用

目的：研究植物(wù)乳杆菌發酵對旋覆花花瓣提取物(wù)對酪氨酸酶的抑制效果，爲開(kāi)發旋覆花提取物(wù)作爲潛在的皮膚增白(bái)成分(fēn)提供依據。
創新點：發現旋覆花植物(wù)乳杆菌發酵的提取物(wù)可以作爲有效的美白(bái)材料。
方法：比較研究了植物(wù)乳杆菌發酵的旋覆花花瓣提取物(wù)對酪氨酸酶活性的抑制作用，并測定了提取物(wù)中(zhōng)總黃酮和多酚類化合物(wù)的含量。通過體(tǐ)外(wài)酪氨酸酶和左旋多巴（L-DOPA）染色來測定其對皮膚的美白(bái)活性。
結論：旋覆花花瓣經過72小(xiǎo)時的發酵後，其提取物(wù)中(zhōng)總黃酮含量提高13.4%。采用500 µg/ml發酵和未發酵的提取物(wù)處理B16F10細胞，細胞活性分(fēn)别爲100.26%和92.15%。此外(wài)，發酵72小(xiǎo)時後，該提取物(wù)對酪氨酸酶活性的抑制率由29.33%上升到41.74%。未處理的對照組B16F10細胞酪氨酸酶活性增加到145.69%。結果表明，旋覆花發酵提取物(wù)對酪氨酸酶活性呈劑量依賴性抑制是促黑激素（α-MSH）的刺激引起。旋覆花植物(wù)乳杆菌發酵的提取物(wù)可以作爲有效的美白(bái)材料。

關鍵詞組：旋覆花；類黃酮；植物(wù)乳杆菌；抗氧化劑；酪氨酸酶抑制劑

Report

An analysis of patents for anesthetic laryngoscopes

Cheng-dong Ji, Xin Pan, Yuan-chang Xiong, Xuan Guo, Shu-wen Qian, Chang Xu, Qiang-qiang Fu, Zhi-ping Yang, Yu Ma, Yue-zhu Wan

DOI: 10.1631/jzus.B1600259 Downloaded: 2420 Clicked: 4205 Cited: 0 Commented: 0(p.825-832) <Full Text> <PPT> 1396

Chinese summary <22> 基于專利文獻的麻醉喉鏡研發分(fēn)析

概要：本文評估專利文獻在麻醉喉鏡技術研發中(zhōng)的引領作用，探讨麻醉喉鏡專利研發的技術重點。結果顯示，近10年來麻醉喉鏡專利數量較以往增長顯著（圖3），呈現以美國領跑，中(zhōng)國和一(yī)些歐洲國家緊随其後的态勢（圖4）。商(shāng)品化的麻醉喉鏡其專利技術經受了臨床實踐與市場的考驗，其專利持有者掌控的關鍵技術更加豐富（圖5）。可視化喉鏡因解決了困難氣管插管問題而成爲未來發展的一(yī)個重要方向，其相應的操作規程也期待進一(yī)步完善。

關鍵詞組：專利文獻分(fēn)析；麻醉喉鏡；技術；數據分(fēn)析；創新動态