Journal of Zhejiang University

Current Issue: <JZUS-B>

Journal of Zhejiang University-SCIENCE B (Biomedicine & Biotechnology)

ISSNs 1673-1581 (Print); 1862-1783 (Online); CN 33-1356/Q; started in 2005,Monthly.

JZUS-B is an international "Biomedicine & Biotechnology" reviewed-Journal indexed by SCI-E, MEDLINE, PMC, BA, BIOSIS Previews, JST, ZR, CA, SA, AJ, ZM, CABI, CSA, etc., and supported by the National Natural Science Foundation of China. It mainly covers research in Biomedicine, Biochemistry and Biotechnology, etc.

Impact factor: 1.099 (2011), 1.108 (2012), 1.293 (2013), 1.278 (2014), 1.303 (2015), 1.676 (2016), 1.815 (2017), 1.879 (2018).

Journal of Zhejiang University SCIENCE B

ISSN 1673-1581(Print), 1862-1783(Online), Monthly

2015 Vol.16 No.12 P.971-1048

<<< CONTENTS >>>

Articles

Effect of lipopolysaccharide on the hemocyte apoptosis of Eriocheir sinensis

Hai-sheng Xu, Sun-jian Lyu, Jie-hao Xu, Bin-jie Lu, Jing Zhao, Song Li, Yi-qun Li, Yu-yin Chen

DOI: 10.1631/jzus.B1500098 Downloaded: 3056 Clicked: 4431 Cited: 4 Commented: 0(p.971-979) <Full Text> <PPT> 1871

Chinese summary <38> 脂多糖對中(zhōng)華絨螯蟹血細胞凋亡影響的研究

目的：評估細菌脂多糖（LPS）在體(tǐ)外(wài)環境下(xià)對中(zhōng)華絨螯蟹血細胞凋亡的影響，并探讨其誘導血細胞凋亡的機制。
創新點：首次在體(tǐ)外(wài)條件下(xià)實驗證明了LPS可誘導中(zhōng)華絨螯蟹血細胞的凋亡，并确定了活性氧自由基在細胞凋亡過程中(zhōng)的變化和作用。
方法：在體(tǐ)外(wài)26 °C條件下(xià)，培養中(zhōng)華絨螯蟹血細胞。用濃度1 µg/ml 的LPS處理血細胞0、4、8和16 h後，利用4’,6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）染色、熒光顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察血細胞的形态變化，用DNA Ladder試劑盒檢測脫氧核糖核酸（DNA）的損傷程度。分(fēn)别用濃度1和10 µg/ml的LPS處理血細胞0、1和2 h，經膜聯蛋白(bái) V-異硫氰酸熒光素（V-FITC）/碘化丙啶（PI）染色後，用流式細胞儀檢測血細胞凋亡數量。收集血細胞制成細胞懸浮液，加入LPS至終濃度爲10 µg/ml，同時加入2’,7’-二氯熒光黃雙乙酸鹽（DCFH-DA）探針至終濃度爲1 µmol/L；對照組加入等量生(shēng)理鹽水和DCFH-DA探針。在26 °C孵育不同時間後，用流式細胞儀和激光共聚焦顯微鏡檢測血細胞活性氧的産生(shēng)情況。
結論：LPS可誘導中(zhōng)華絨螯蟹血細胞出現典型的凋亡特征，包括染色質濃縮和邊聚、核膜破裂、線粒體(tǐ)腫脹、凋亡小(xiǎo)體(tǐ)形成等（圖1和2），形成明顯的DNA梯形條帶（圖3），且細胞凋亡數量與LPS濃度呈正相關，大(dà)多數凋亡細胞處于凋亡晚期（圖4）。活性氧檢測結果顯示：經LPS刺激後，細胞内活性氧自由基信号顯著增強，随後又(yòu)迅速減弱（圖5和6）。綜上所述，體(tǐ)外(wài)LPS可誘導中(zhōng)華絨螯蟹血細胞産生(shēng)明顯的凋亡反應，且凋亡過程伴随着顯著的活性氧爆發。

關鍵詞組：血細胞；中(zhōng)華絨螯蟹；脂多糖；凋亡；活性氧自由基

Induction of follicular luteinization by equine chorionic gonadotropin in cyclic guinea pigs

Jun-rong Li, Wei Wang, Fang-xiong Shi

DOI: 10.1631/jzus.B1500046 Downloaded: 2564 Clicked: 4261 Cited: 1 Commented: 0(p.980-990) <Full Text> <PPT> 1575

Chinese summary <34> 正常發情周期豚鼠經孕馬血清促性腺激素誘導的卵泡黃體(tǐ)化研究

目的：研究孕馬血清促性腺激素（eCG）對發情周期豚鼠卵巢卵泡的作用。
創新點：首次發現eCG對于發情周期豚鼠發揮了類似促黃體(tǐ)素的作用，而非促卵泡素的作用。
方法：将成年雌性豚鼠（400~700 g，連續2次以上觀察到穩定的16天發情周期）分(fēn)爲對照組（腹腔注射生(shēng)理鹽水）和實驗組（腹腔注射eCG）。實驗組根據注射強度分(fēn)爲20 IU組和50 IU組，并分(fēn)别于注射後4和8天采集豚鼠卵巢。用蘇木精-伊紅染色法（H&E）和免疫組化法觀察豚鼠卵巢變化情況。測定注射後4天卵巢卵泡大(dà)小(xiǎo)和數量，測定注射後8天卵巢和子宮重量、黃體(tǐ)數量、黃體(tǐ)化細胞數量和閉鎖黃體(tǐ)細胞比例。
結論：本實驗中(zhōng)，豚鼠經eCG注射後卵巢變化結果顯示：發情期豚鼠卵巢經eCG注射發生(shēng)明顯的形态改變（圖1），50 IU組豚鼠卵巢在注射後8天出現了黃體(tǐ)化未破裂卵泡（LUF）現象（圖3）。免疫組化結果顯示增值細胞核抗原（PCNA）和類激素調節蛋白(bái)（StAR）都免疫定位于黃體(tǐ)化卵泡（圖8）。綜上所述，eCG對于發情期豚鼠發揮了類似促黃體(tǐ)素的作用。

關鍵詞組：孕馬血清促性腺激素；豚鼠；卵泡發育；增值細胞核抗原；類激素調節蛋白(bái)

Construction and analysis of the cDNA subtraction library of yeast and mycelial phases of Sporothrix globosa isolated in China: identification of differentially expressed genes

Qing-bi Hu, Yu He, Xun Zhou

DOI: 10.1631/jzus.B1500151 Downloaded: 2105 Clicked: 4105 Cited: 1 Commented: 0(p.991-997) <Full Text> <PPT> 1687

Chinese summary <33> 中(zhōng)國球形孢子絲菌雙相cDNA消減文庫構建及其差異基因的篩選和驗證

目的：爲進一(yī)步研究中(zhōng)國球形孢子絲菌的雙向轉換機制，明确目的差異基因對我(wǒ)國球形孢子絲菌形态和雙相轉換的影響，探讨可能參與的信号傳導通路，以期較全面地探讨孢子絲菌雙相轉換相關的分(fēn)子機制，也爲篩選抗真菌藥物(wù)研究提供新的靶位和切入點。
創新點：以中(zhōng)國球形孢子絲菌雙向轉換爲立足點，應用抑制性消減文庫成功構建的高特異性的中(zhōng)國球形孢子絲菌酵母相（Y）和菌絲相（M）的正反cDNA基礎上，對中(zhōng)國球形孢子絲菌雙相轉換相關基因進行生(shēng)物(wù)信息學分(fēn)析并對部分(fēn)有意義的差異表達基因進行驗證。
方法：本實驗通過抑制性消減雜(zá)交技術構建中(zhōng)國球形孢子絲菌酵母相和菌絲相的正反cDNA消減文庫，并對差異基因進行生(shēng)物(wù)信息學分(fēn)析，獲得部分(fēn)有意義的差異表達基因，再通過實時熒光聚合酶鏈反應（PCR）技術驗證目的基因在雙相中(zhōng)的差異表達。
結論：通過抑制性消減雜(zá)交技術對中(zhōng)國球形孢子絲菌的正向和反向兩個文庫進行篩選，獲得可能參與球形孢子絲菌細胞壁合成、信号轉到、新陳代謝類等相關的片段重疊群（contigs），結果表明中(zhōng)國球形孢子絲菌在雙相型轉換中(zhōng)存在明顯表達差異基因，同時利用相對定量的實時熒光定量技術對其中(zhōng)兩個基因（細胞表面分(fēn)子類基因細胞周期檢測點激酶CHK和結構基因類核糖體(tǐ)RNA基因）進行驗證，認爲它們可能與雙相轉換有關。

關鍵詞組：球形孢子絲菌；雙相；抑制性消減雜(zá)交技術（SSH）；實時熒光PCR技術

Submerged fermentation production and characterization of intracellular triterpenoids from Ganoderma lucidum using HPLC-ESI-MS

Mei-lin Cui, Huan-yi Yang, Guo-qing He

DOI: 10.1631/jzus.B1500147 Downloaded: 2459 Clicked: 4253 Cited: 4 Commented: 0(p.998-1010) <Full Text> <PPT> 1765

Chinese summary <30> 利用液體(tǐ)發酵提高靈芝三萜産量及HPLC-ESI-MS鑒定靈芝菌絲中(zhōng)靈芝酸成分(fēn)

目的：通過優化液體(tǐ)發酵培養基提高靈芝三萜産量，并對其三萜成分(fēn)進行初步鑒定。
創新點：麥芽作爲啤酒生(shēng)産原料，含有豐富的糖類及其他營養物(wù)質，并且價格低廉，來源廣泛。本文首次将麥芽汁作爲碳源物(wù)質以提高靈芝三萜産量，并對其所含靈芝酸成分(fēn)進行初步鑒定。
方法：以靈芝菌絲生(shēng)物(wù)量和胞内三萜産量爲檢測指标，對其液體(tǐ)發酵培養基中(zhōng)的碳（C）源和氮（N）源進行篩選，并利用單因素實驗确定其相應濃度，再經響應面法優化液體(tǐ)發酵培養基（C源、N源、pH）（表1）。另一(yī)方面，酸堿轉化法純化靈芝三萜提取物(wù)後，利用高效液相色譜-電噴霧-質譜（HPLC-ESI-MS）法初步鑒定靈芝所含靈芝酸成分(fēn)（表2）。
結論：本實驗響應面結果顯示：當培養基含麥芽汁4.1%，酵母浸出粉1.89%，pH爲5.40時，靈芝液體(tǐ)發酵菌絲生(shēng)物(wù)量及胞内三萜産量均達到最優，分(fēn)别爲1.87 g/100 ml和93.21 mg/100 ml。經HPLC-ESI-MS鑒定，初步确定其含有10種靈芝酸成分(fēn)。

關鍵詞組：靈芝；麥芽汁；響應面；靈芝酸；高效液相色譜-電噴霧-質譜（HPLC-ESI-MS）

Mutualistic fungal endophytes produce phytohormones and organic acids that promote japonica rice plant growth under prolonged heat stress

Muhammad Waqas, Abdul Latif Khan, Raheem Shahzad, Ihsan Ullah, Abdur Rahim Khan, In-Jung Lee

DOI: 10.1631/jzus.B1500081 Downloaded: 2783 Clicked: 4073 Cited: 3 Commented: 0(p.1011-1018) <Full Text> <PPT> 1692

Chinese summary <35> 持續高溫脅迫環境下(xià)内生(shēng)菌産生(shēng)植物(wù)激素和有機酸促進粳稻生(shēng)長的研究

目的：研究在高溫脅迫環境下(xià)内生(shēng)菌（Paecilomyces formosus LWL1）對粳稻生(shēng)長的影響。
創新點：首次探讨P. formosus LWL1産生(shēng)的植物(wù)激素和有機酸在緩解粳稻熱應激方面的作用。
方法：比較正常和高溫脅迫兩種環境下(xià)，P. formosus LWL1對Dongjin粳稻植株的生(shēng)長狀況及内源性脫落酸、茉莉酸和總蛋白(bái)水平變化的作用。
結論：内生(shēng)菌在正常和高溫脅迫條件下(xià)均能顯著提高植物(wù)生(shēng)長情況，包括株高、鮮重、幹重和葉綠素含量。内生(shēng)菌組的植株具有更低的内源性脅迫信号化合物(wù)水平及提升的總蛋白(bái)量，表明其具有保護粳稻的作用。這種内生(shēng)菌可能有利于作物(wù)在高溫環境下(xià)生(shēng)長的耐受性。

關鍵詞組：拟青黴菌；促進植物(wù)生(shēng)長；熱應激緩和；植物(wù)激素；有機酸；植物(wù)内生(shēng)菌

Long-term effects of oral tea polyphenols and Lactobacillus brevis M8 on biochemical parameters, digestive enzymes, and cytokines expression in broilers

Hua-li Li, Zong-jun Li, Zhong-shan Wei, Ting Liu, Xiao-zuo Zou, Yong Liao, Yu Luo

DOI: 10.1631/jzus.B1500160 Downloaded: 2492 Clicked: 4966 Cited: 5 Commented: 0(p.1019-1026) <Full Text> <PPT> 1739

Chinese summary <34> 茶多酚和乳酸菌影響肉雞血液生(shēng)化、消化酶以及腸道細胞因子表達的研究

目的：茶多酚和乳酸菌在動物(wù)營養上的作用已經得到廣泛的驗證，但是關于二者聯合作用的研究鮮有報道。本文采用肉雞作爲試驗模型，研究了茶多酚和乳酸菌聯合灌喂對肉雞血液生(shēng)化、消化酶以及腸道細胞因子表達的影響。
創新點：本研究首次采用聯合灌喂茶多酚和乳酸菌，探讨了二者聯合作用對肉雞的影響，并通過模拟生(shēng)産，長期觀察了茶多酚和乳酸菌對肉雞的影響。
方法：對肉仔雞灌喂不同濃度的茶多酚和乳酸菌，在第56和84天随機屠宰取樣。收集血液檢查血液生(shēng)化指标，并測定消化酶活性。取腸道樣品提取RNA，采用反轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）檢測細胞因子的表達以及相關信号通路的激活。
結論：長期灌喂茶多酚和乳酸菌改善了肉雞脂質代謝、消化酶活性以及炎症反應，其機制可能是通過影響了NF-κB信号通路。

關鍵詞組：茶多酚；乳酸菌；NF-κB；肉雞

Transcriptome changes in Polygonum multiflorum Thunb. roots induced by methyl jasmonate

Hong-chang Liu, Wei Wu, Kai Hou, Jun-wen Chen, Zhi Zhao

DOI: 10.1631/jzus.B1500150 Downloaded: 2294 Clicked: 4032 Cited: 1 Commented: 0(p.1027-1041) <Full Text> <PPT> 1493

Chinese summary <267> 茉莉酸甲酯處理對何首烏根轉錄組的影響

目的：研究外(wài)源茉莉酸甲酯（MeJA）處理對中(zhōng)藥何首烏（Polygonum multiflorum）根轉錄組的影響，分(fēn)析在外(wài)源MeJA刺激下(xià)何首烏根各代謝途徑中(zhōng)差異表達基因的變化，爲尋找影響何首烏根主要藥效成分(fēn)合成的關鍵酶基因奠定基礎。
創新點：首次在中(zhōng)藥何首烏上利用外(wài)源MeJA處理研究何首烏根轉錄組的變化，且獲得了根中(zhōng)各代謝途徑的大(dà)量差異表達基因。
方法：将何首烏植株分(fēn)爲對照組（Hoagland營養液灌根）和實驗組（含0.25 mmol/L MeJA的Hoagland營養液灌根）。灌根處理26 h後，分(fēn)别提取對照組和實驗組根中(zhōng)的總RNA，利用新一(yī)代測序技術分(fēn)析對照組和實驗組根的轉錄組變化并進行測序。同時，利用美國國家生(shēng)物(wù)技術信息中(zhōng)心（NCBI）的蛋白(bái)質數據庫和基因數據庫信息，對所測cDNA序列進行基因功能注釋和代謝途徑歸類，尋找MeJA刺激下(xià)何首烏根各條代謝途徑中(zhōng)的差異表達基因。
結論：外(wài)源MeJA刺激處理可影響中(zhōng)藥何首烏根轉錄組的表達變化（表S1）。與對照相比，外(wài)源MeJA處理可導緻何首烏根中(zhōng)4535個基因上調，14 142個基因下(xià)調變化，并分(fēn)别在125個代謝途徑中(zhōng)富集（表1）。代謝途徑差異表達基因分(fēn)析的結果表明，可在相應代謝途徑中(zhōng)找到影響何首烏某些主要藥效成分(fēn)合成的關鍵酶基因（圖2）。差異表達基因的代謝途徑歸類分(fēn)析結果提示今後可對何首烏根各代謝途徑中(zhōng)的關鍵酶基因分(fēn)别進行研究（表1）。綜上所述，利用外(wài)源MeJA處理後進行轉錄組測序對尋找何首烏中(zhōng)主要有效成份合成的關鍵酶基因有重要價值。

關鍵詞組：何首烏；茉莉酸甲酯；轉錄組變化；差異表達基因

Investigation of one-lung ventilation postoperative cognitive dysfunction and regional cerebral oxygen saturation relations

Xi-ming Li, Feng Li, Zhong-kai Liu, Ming-tao Shao

DOI: 10.1631/jzus.B1500030 Downloaded: 2330 Clicked: 3836 Cited: 2 Commented: 0(p.1042-1048) <Full Text> <PPT> 1608

Chinese summary <31> 單肺通氣術後認知(zhī)功能障礙和腦氧飽和度關系的研究

目的：探讨單肺通氣（OLV）患者術後認知(zhī)功能障礙（POCD）與局部腦氧飽和度（rSO₂）的關系。
創新點：POCD的發生(shēng)與患者年齡及術中(zhōng)rSOv較基礎值下(xià)降的最大(dà)百分(fēn)數（rSO_{2, %max}）密切相關，術中(zhōng)rSO_{2, %max}>10.1%時，提示可能發生(shēng)POCD。術中(zhōng)rSO₂監測可作爲POCD的預測手段。
方法：擇期行OLV開(kāi)胸手術患者50例（美國标準協會（ASA）分(fēn)級I~III），于術前1天和術後7天分(fēn)别進行神經心理測驗。術中(zhōng)利用近紅外(wài)光譜技術（NIRS）連續監測rSO₂，并計算麻醉誘導前（t₁）、單肺通氣開(kāi)始（t₂）、單肺通氣30 min（t₃）、單肺通氣60 min（t₄）、單肺通氣結束（t₅）和手術結束（t₆）時刻的平均腦氧飽和度、rSO₂最小(xiǎo)值（rSO_{2 min}）和rSO_{2, %max}。
結論：OLV患者POCD的發生(shēng)與rSO₂有關，rSO₂監測可能是預測發生(shēng)POCD的有效手段之一(yī)。

關鍵詞組：單肺通氣；術後認知(zhī)功能障礙；局部腦氧飽和度