Journal of Zhejiang University

Current Issue: <JZUS-B>

Journal of Zhejiang University-SCIENCE B (Biomedicine & Biotechnology)

ISSNs 1673-1581 (Print); 1862-1783 (Online); CN 33-1356/Q; started in 2005,Monthly.

JZUS-B is an international "Biomedicine & Biotechnology" reviewed-Journal indexed by SCI-E, MEDLINE, PMC, BA, BIOSIS Previews, JST, ZR, CA, SA, AJ, ZM, CABI, CSA, etc., and supported by the National Natural Science Foundation of China. It mainly covers research in Biomedicine, Biochemistry and Biotechnology, etc.

Impact factor: 1.099 (2011), 1.108 (2012), 1.293 (2013), 1.278 (2014), 1.303 (2015), 1.676 (2016), 1.815 (2017), 1.879 (2018).

Journal of Zhejiang University SCIENCE B

ISSN 1673-1581(Print), 1862-1783(Online), Monthly

2014 Vol.15 No.2 P.109-200

<<< CONTENTS >>>

Articles

Analysis of endophytic fungi in roots of Santalum album Linn. and its host plant Kuhnia rosmarinifolia Vent.

Si-sheng Sun, Xiao-mei Chen, Shun-xing Guo

DOI: 10.1631/jzus.B1300011 Downloaded: 4725 Clicked: 7979 Cited: 2 Commented: 0(p.109-115) <Full Text>

Chinese summary <42> 檀香及其宿主植物(wù)假蒿根中(zhōng)内生(shēng)真菌的研究

研究目的：檀香（Santalum album Linn.）爲檀香科（Santalaceae）檀香屬（Santalum）樹(shù)種，屬于常綠半寄生(shēng)小(xiǎo)喬木，其心材爲傳統名貴中(zhōng)藥。檀香與其寄主植物(wù)假蒿通過根端的吸盤相連，探讨檀香與其宿主之間内生(shēng)真菌的關系具有重要意義。
創新要點：假蒿（Kuhnia rosmarinifolia Vent.）是幼齡檀香很好的寄主。目前已經對許多藥用植物(wù)的内生(shēng)真菌的分(fēn)離(lí)和鑒定進行了大(dà)量研究，但是關于檀香和假蒿之間關系的研究報道較少。本研究首次探讨了檀香及其宿主植物(wù)假蒿根中(zhōng)内生(shēng)真菌的數量和種類，爲進一(yī)步研究兩者之間的關系提供一(yī)些有用的信息。
研究方法：采用組織塊分(fēn)離(lí)法從檀香的根和其宿主植物(wù)假蒿的根部材料分(fēn)離(lí)内生(shēng)真菌，并采用形态學鑒定和分(fēn)子鑒定手段對分(fēn)離(lí)的内生(shēng)真菌進行鑒定。
重要結論：從檀香的根和其宿主植物(wù)假蒿的根中(zhōng)160個組織塊中(zhōng)分(fēn)離(lí)和鑒定了共25個真菌類群，其中(zhōng)青黴屬真菌Penicillium sp. 1爲檀香根中(zhōng)優勢菌，鐮孢屬真菌Fusarium sp. 1爲假蒿根中(zhōng)優勢菌。特别有意思的是兩種植物(wù)根中(zhōng)沒有分(fēn)離(lí)到明顯相同的内生(shēng)真菌。

關鍵詞組：檀香；假蒿；内生(shēng)真菌；青黴屬真菌（Penicillium sp.）；鐮孢屬真菌（Fusarium sp.）

Improvement of a gene targeting system for genetic manipulation in Penicillium digitatum

Qian Xu, Cong-yi Zhu, Ming-shang Wang, Xue-peng Sun, Hong-ye Li

DOI: 10.1631/jzus.B1300213 Downloaded: 3351 Clicked: 6465 Cited: 3 Commented: 1(p.116-124) <Full Text> <PPT> 1864

Chinese summary <35> 一(yī)種高效的柑橘綠黴菌基因敲除體(tǐ)系的構建

研究目的：提高柑橘綠黴菌基因敲除效率。
創新要點：低效的基因敲除與絲狀真菌非同源末端鏈接（NHEJ）的DNA雙鏈斷裂修複途徑有關。爲提高柑橘綠黴病菌基因敲除效率，本研究利用農杆菌介導的轉化體(tǐ)系，獲得NHEJ途徑中(zhōng)關鍵因子Ku80的缺失突變體(tǐ)（ΔPdKu80）。
研究方法：與野生(shēng)型菌株相比，以ΔPdKu80作爲出發菌株，提高柑橘綠黴病菌PdbrlA和PdmpkA的基因敲除效率（見表1）。
重要結論：ΔPdKu80的營養生(shēng)長、産孢和緻病性與野生(shēng)型菌株基本一(yī)緻。ΔPdKu80作爲出發菌株，能顯著提高柑橘綠黴菌的敲除效率。

關鍵詞組：指狀青黴；基因敲除；非同源末端鏈接（NHEJ）；Ku80

Analysis of promoters of microRNAs from a Glycine max degradome library

Yi-qiang Han, Zheng Hu, Dian-feng Zheng, Ya-mei Gao

DOI: 10.1631/jzus.B1300179 Downloaded: 3243 Clicked: 6418 Cited: 5 Commented: 0(p.125-132) <Full Text> <PPT> 2045

Chinese summary <31> 大(dà)豆降解組文庫microRNAs的啓動子分(fēn)析

研究目的：通過分(fēn)析miRNA的核心啓動子和順式作用元件爲進一(yī)步解析大(dà)豆（Glycine max）miRNAs表達調控及其功能研究提供重要信息。
創新要點：利用生(shēng)物(wù)信息學方法全面解析了大(dà)豆降解組文庫miRNA的啓動子特征，并依據順式作用元件及靶基因構建了miRNA的表達與生(shēng)長素響應因子、赤黴素響應因子之間存在潛在的負反饋調控網絡。
研究方法：本研究利用TSSP 程序和PlantCARE數據庫預測了來自大(dà)豆降解組文庫的440個miRNA的核心啓動子以及369個miRNAs的順式作用元件，并依據順式作用元件及靶基因構建miRNA調控網絡。
重要結論：83.86%的miRNA在其上遊序列中(zhōng)含有啓動子，8.64%的miRNA在其下(xià)遊序列中(zhōng)含有啓動子，21.59%的miRNA包含增強子。核心啓動子的TATA盒與轉錄起始位點（TSSs）的分(fēn)布相似（見圖2）。此外(wài)，對轉錄起始位點5'端的順式作用元件預測爲miRNAs的可能功能和表達的時空性提供了線索。miRNAs的順式作用元件和靶基因的分(fēn)析顯示，部分(fēn)miRNA的表達與生(shēng)長素響應因子、赤黴素響應因子之間存在潛在的負反饋調控（見圖3）。

關鍵詞組：大(dà)豆；MicroRNA（miRNA）；啓動子；順式作用元件；預測

Molecular variability and evolution of a natural population of tomato yellow leaf curl virus in Shanghai, China

Xiu-ling Yang, Meng-ning Zhou, Ya-juan Qian, Yan Xie, Xue-ping Zhou

DOI: 10.1631/jzus.B1300110 Downloaded: 3291 Clicked: 7678 Cited: 7 Commented: 0(p.133-142) <Full Text> <PPT> 1967

Chinese summary <26> 番茄黃化曲葉病毒自然種群的分(fēn)子變異和進化研究

研究目的：2006年我(wǒ)國上海首次發現番茄黃化曲葉病毒（TYLCV），随後TYLCV迅速蔓延至全國13個省份和自治區。本研究分(fēn)析了2006至2010年期間TYLCV在我(wǒ)國首發地上海市的分(fēn)子變異規律。
創新要點：本研究持續五年追蹤田間TYLCV，分(fēn)析TYLCV的全長基因組序列、分(fēn)子變異及種群遺傳結構，爲防控TYLCV提供理論依據。
研究方法：2006至2010年從上海采集了26個TYLCV的分(fēn)離(lí)物(wù)，利用高保真性的滾環擴增技術獲得TYLCV分(fēn)離(lí)物(wù)的全長基因組。應用MEGA5等生(shēng)物(wù)信息學軟件分(fēn)析TYLCV的分(fēn)子變異。
重要結論：TYLCV自然種群具有與RNA病毒相似的突變率，以基因間隔區的分(fēn)子變異最大(dà)，平均突變率爲4.81×10⁻³（見圖2和表2）。TYLCV的大(dà)部分(fēn)基因都處于負向選擇，但包含在C1開(kāi)放(fàng)閱讀框内的C4，卻與C1承受着不同的選擇壓而處于正向選擇（見圖3和表6）。

關鍵詞組：分(fēn)子變異；番茄黃化曲葉病毒（TYLCV）；雙生(shēng)病毒；進化

Stability and cytotoxicity of angiotensin-I-converting enzyme inhibitory peptides derived from bovine casein

Wei Wu, Pan-pan Yu, Feng-yang Zhang, Hong-xia Che, Zhan-mei Jiang

DOI: 10.1631/jzus.B1300239 Downloaded: 3258 Clicked: 6706 Cited: 6 Commented: 0(p.143-152) <Full Text>

Chinese summary <23> 牛乳酪蛋白(bái)源ACE抑制肽的穩定性和毒理特性研究

研究目的：酸堿熱處理對牛乳酪蛋白(bái)源血管緊張素轉化酶（ACE）抑制肽的抑制活性、遊離(lí)氨基、色澤及其毒理特性的影響。
創新要點：在pH 9.0~12.0的熱處理條件下(xià)，牛乳酪蛋白(bái)源ACE抑制肽的抑制活性降低，色澤加深。熱處理後的ACE抑制肽對Caco-2細胞和ECV-304細胞沒有毒性作用。
研究方法：以ACE抑制活性、遊離(lí)氨基、色差值和細胞存活率爲檢測指标，研究了酸堿熱處理對ACE抑制肽的穩定性和毒理特性影響。
重要結論：高溫和堿性熱處理能破壞酪蛋白(bái)源ACE抑制肽的穩定性（見圖1~3）。

關鍵詞組：血管緊張素轉化酶（ACE）抑制肽；熱處理；穩定性；毒理特性

Cytotoxicity and enhancement activity of essential oil from Zanthoxylum bungeanum Maxim. as a natural transdermal penetration enhancer

Yi Lan, Qing Wu, Ying-qiu Mao, Qiong Wang, Jing An, Yan-yan Chen, Wen-ping Wang, Bo-chen Zhao, Na Liu, Ye-wen Zhang

DOI: 10.1631/jzus.B1300230 Downloaded: 3643 Clicked: 11735 Cited: 15 Commented: 0(p.153-164) <Full Text> <PPT> 2036

Chinese summary <34> 花椒揮發油作爲天然經皮促透劑的細胞毒性及促透活性

研究目的：研究花椒揮發油作爲天然經皮促透劑的促透活性及其促透機制，同時評價其皮膚細胞毒性。
創新要點：首次評價了花椒揮發油的皮膚細胞毒性、經皮促透活性及其作用機制。
研究方法：利用表皮角質形成細胞（HaCaT）和真皮成纖維細胞（CCC-ESF-1）評價花椒揮發油的細胞毒性；采用親水性及親脂性模型藥測定揮發油促透活性的基礎上研究其促透作用機制。
重要結論：花椒揮發油具有良好促透活性并具有較低皮膚細胞毒性。

關鍵詞組：花椒揮發油；天然經皮促透劑；透皮吸收；表皮角質形成細胞（HaCaT）；傅利葉變換紅外(wài)光譜（ATR-FTIR）

Production of a monoclonal antibody against oxytetracycline and its application for oxytetracycline residue detection in shrimp

Tossapon Wongtangprasert, Wirongrong Natakuathung, Umaporn Pimpitak, Anumart Buakeaw, Tanapat Palaga, Kittinan Komolpis, Nanthika Khongchareonporn

DOI: 10.1631/jzus.B1300181 Downloaded: 2985 Clicked: 6572 Cited: 6 Commented: 0(p.165-172) <Full Text> <PPT> 1879

Chinese summary <25> 抗土黴素單克隆抗體(tǐ)的制備及其在蝦中(zhōng)土黴素殘留的檢測應用

研究目的：抗土黴素單克隆抗體(tǐ)的制備和特性分(fēn)析，并用于間接競争酶聯免疫吸附測定法（icELISA）分(fēn)析蝦樣品中(zhōng)土黴素的殘留。
創新要點：本研究建立分(fēn)泌抗土黴素單克隆抗體(tǐ)的雜(zá)交瘤細胞株，篩選出對蝦中(zhōng)土黴素殘留檢測具有較高靈敏度的單克隆抗體(tǐ)2-4F。
研究方法：用細胞雜(zá)交技術使土黴素-牛血清白(bái)蛋白(bái)偶聯物(wù)免疫的BALC/c雌性小(xiǎo)鼠的脾細胞與骨髓瘤細胞融合，建立三株分(fēn)泌抗土黴素單克隆抗體(tǐ)的雜(zá)交瘤細胞株（2-4F、7-3G和11-11A），并制備它們的單克隆抗體(tǐ)。通過icELISA法分(fēn)析單克隆抗體(tǐ)對土黴素的半抑制質量濃度（IC₅₀）和交叉反應率，明确其靈敏度和特異性。
重要結論：實驗結果發現單克隆抗體(tǐ)2-4F具有最高的靈敏度，對土黴素的IC₅₀爲7.01 ng/ml，且該單抗特異性強，僅與羅利環素之間有強烈的交叉反應，而與非相關抗生(shēng)素不發生(shēng)交叉反應。當利用單克隆抗體(tǐ)2-4F檢測蝦樣品中(zhōng)的土黴素含量時，其批内和批間回收率分(fēn)别爲82%~118%和96%~113%，變異系數分(fēn)别爲3.9%~13.9%和5.5%~14.9%。因此，單克隆抗體(tǐ)2-4F可用于蝦産品中(zhōng)土黴素殘留分(fēn)析試劑盒的開(kāi)發。

關鍵詞組：土黴素；單克隆抗體(tǐ)；酶聯免疫吸附測定法（ELISA）；蝦

In vitro antioxidant activity and potential inhibitory action against α-glucosidase of polysaccharides from fruit peel of tea (Camellia sinensis L.)

Yue-fei Wang, Jie Wang, Jing Wu, Ping Xu, Yi-qi Wang, Jun-jie Gao, Danielle Hochstetter

DOI: 10.1631/jzus.B1300186 Downloaded: 3570 Clicked: 9099 Cited: 6 Commented: 0(p.173-180) <Full Text> <PPT> 2051

Chinese summary <28> 茶果皮多糖理化性質、體(tǐ)外(wài)抗氧化活性及對α-葡萄糖苷酶的抑制作用

研究目的：利用響應面優化茶果皮多糖（TFPP）提取條件，用乙醇分(fēn)級分(fēn)段得到4個多糖組分(fēn)（TFPP-0、TFPP-20、TFPP-40和TFPP-60），并研究其理化性質、抗氧化活性和對α-葡萄糖苷酶抑制作用，爲綜合高效利用茶果皮多糖資(zī)源提供理論基礎。
創新要點：1. 首次将茶果皮作爲一(yī)種潛在生(shēng)物(wù)資(zī)源研究；2. 首次研究茶果皮多糖這一(yī)功能成分(fēn)；3. 将工(gōng)藝優化、理化性質和生(shēng)物(wù)活性結合研究。
研究方法：三因素三水平響應面設計（見表1），傅裏葉轉換紅外(wài)光譜法分(fēn)析茶果皮粗多糖的功能團結構（見圖3），高效液相色譜法檢測單糖組分(fēn)（見表2），2,2′-氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵鹽（ABTS）自由基清除法（見圖 4a）和鐵離(lí)子還原能力法（FRAP）（見圖4b）分(fēn)析茶果皮多糖抗氧化活性。
重要結論：1. 茶果皮多糖是一(yī)種水溶性的酸性雜(zá)多糖蛋白(bái)複合物(wù)；2. 乙醇分(fēn)級是一(yī)種有效多糖分(fēn)離(lí)手段；3. 茶果皮多糖具有出色的生(shēng)物(wù)活性；4. 茶果皮資(zī)源可以作爲一(yī)種可再生(shēng)生(shēng)物(wù)資(zī)源進行深度的開(kāi)發。

關鍵詞組：茶果皮；多糖；響應面；抗氧化；α-葡萄糖苷酶抑制

Response of seed tocopherols in oilseed rape to nitrogen fertilizer sources and application rates

Nazim Hussain, Hui Li, Yu-xiao Jiang, Zahra Jabeen, Imran Haider Shamsi, Essa Ali, Li-xi Jiang

DOI: 10.1631/jzus.B1300036 Downloaded: 3358 Clicked: 7071 Cited: 6 Commented: 0(p.181-193) <Full Text> <PPT> 1983

Chinese summary <30> 氮肥種類與施量對油菜種子生(shēng)育酚的影響

研究目的：生(shēng)育酚是菜籽重要的品質指标，氮肥是影響作物(wù)生(shēng)物(wù)學與籽粒産量最常用的肥料。這項研究旨在搞清楚氮肥種類與施量對油菜種子生(shēng)育酚含量與組分(fēn)的确切影響，以及這種影響在基因型之間的差異。
創新要點：這篇論文研究了不同的氮肥種類（硝态氮與铵态氮）與低、中(zhōng)、高施用量對種子生(shēng)育酚總量與組分(fēn)的影響，并分(fēn)析了其中(zhōng)的原因，爲通過合理的氮肥施用方案配置，以達到最理想的菜籽生(shēng)育酚含量或組分(fēn)提供依據。
研究方法：采用盆缽實驗控制氮肥施量與流失的精準方法，五種基因型、二種氮肥種類、三檔施量水平，三重複控制誤差；嘗試用氣相色譜法檢測菜籽生(shēng)育酚含量的新方法。
重要結論：尿素比硝酸氨更有利于菜籽總生(shēng)育酚、阿爾法生(shēng)育酚及伽馬生(shēng)育酚的有效形成；提高氮肥施量對于菜籽形成高含量的總生(shēng)育酚與伽馬生(shēng)育酚非常有效，但對提高菜籽阿爾法生(shēng)育酚含量的效果卻不太明顯。

關鍵詞組：油菜；氮肥施量；尿素；硝酸氨；生(shēng)育酚

Immunocytochemical localization of carbonic anhydrase in the pseudobranch tissue of the rainbow trout Oncorhynchus mykiss

S. M. Rahim, A. G. Mazlan, K. D. Simon, J. P. Delaunoy, P. Laurent

DOI: 10.1631/jzus.B1200297 Downloaded: 3218 Clicked: 10157 Cited: 5 Commented: 0(p.194-200) <Full Text> <PPT> 1676

Chinese summary <25> 虹鳟假鰓組織中(zhōng)的碳酸酐酶免疫細胞化學定位

研究目的：假腮的功能早已引起科學家興趣，但還有待闡明。本文通過研究硬骨魚類品種虹鳟魚（Oncorhynchus mykiss）的假腮碳酸酐酶的免疫定位，來探讨假腮碳酸酐酶的生(shēng)理功能。
研究方法：免疫組織化學染色技術。
重要結論：免疫組化結果顯示碳酸酐酶分(fēn)布在假腮細胞中(zhōng)，更精确地說是在其細胞頂端分(fēn)布。細胞基底端、管狀系統、毛細血管和柱細胞均無免疫染色。免疫細胞化學定位進一(yī)步驗證了這些結果，并顯示一(yī)部分(fēn)是細胞質碳酸酐酶，其餘的與細胞膜結構連接。此外(wài)，腔隙層未顯示出免疫過氧化物(wù)酶的活性。本研究揭示了假腮碳酸酐酶的功能與細胞外(wài)介質有關，碳酸酐酶能幹預傳入神經纖維刺激機制。

關鍵詞組：碳酸酐酶；假鰓；虹鳟；免疫組化；免疫細胞化學；生(shēng)理學