Journal of Zhejiang University

Current Issue: <JZUS-B>

Journal of Zhejiang University-SCIENCE B (Biomedicine & Biotechnology)

ISSNs 1673-1581 (Print); 1862-1783 (Online); CN 33-1356/Q; started in 2005,Monthly.

JZUS-B is an international "Biomedicine & Biotechnology" reviewed-Journal indexed by SCI-E, MEDLINE, PMC, BA, BIOSIS Previews, JST, ZR, CA, SA, AJ, ZM, CABI, CSA, etc., and supported by the National Natural Science Foundation of China. It mainly covers research in Biomedicine, Biochemistry and Biotechnology, etc.

Impact factor: 1.099 (2011), 1.108 (2012), 1.293 (2013), 1.278 (2014), 1.303 (2015), 1.676 (2016), 1.815 (2017), 1.879 (2018).

Journal of Zhejiang University SCIENCE B

ISSN 1673-1581(Print), 1862-1783(Online), Monthly

2021 Vol.22 No.5 P.341-430

Cover:

<440>

Contents:

<405>

<<< CONTENTS >>>

Review

Review: Exosomes in bladder cancer: novel biomarkers and targets

Hao GENG, Qingchen ZHOU, Wenhao GUO, Ling LU, Liangkuan BI, Yi WANG, Jie MIN, Dexin YU, Zhaofeng LIANG

DOI: 10.1631/jzus.B2000711 Downloaded: 1816 Clicked: 3006 Cited: 0 Commented: 0(p.341-347) <Full Text> <PPT> 1327

Chinese summary <21> 外(wài)泌體(tǐ)與膀胱癌：新的生(shēng)物(wù)标志(zhì)物(wù)和靶點

概要：外(wài)泌體(tǐ)是納米大(dà)小(xiǎo)的囊泡，包含蛋白(bái)質、核酸、碳水化合物(wù)和脂質等各種生(shēng)物(wù)活性成分(fēn)，這些成分(fēn)會随細胞的類型和生(shēng)理狀态而變化。近年來，一(yī)些研究表明不但外(wài)泌體(tǐ)可以爲包括膀胱癌在内的多種腫瘤提供新的無創性診斷和預後生(shēng)物(wù)标志(zhì)物(wù)，而且外(wài)泌體(tǐ)脂質雙層膜結構可使其成爲治療應用的理想載體(tǐ)。外(wài)泌體(tǐ)具有豐度高、穩定性好、組織特異性強，以及在體(tǐ)液中(zhōng)廣泛分(fēn)布等特點，且可以由在不同狀态下(xià)的多種細胞所分(fēn)泌。因此，外(wài)泌體(tǐ)具有作爲膀胱癌診斷和預後生(shēng)物(wù)标志(zhì)物(wù)的巨大(dà)潛力。本文就外(wài)泌體(tǐ)在膀胱癌發生(shēng)發展中(zhōng)的作用及其研究現狀進行綜述，并聚焦于外(wài)泌體(tǐ)在膀胱癌診斷、治療和預後中(zhōng)的臨床應用。

關鍵詞組：外(wài)泌體(tǐ)；膀胱癌；功能；臨床應用；生(shēng)物(wù)标志(zhì)物(wù)

Research Articles

Protective effect of recombinant Lactobacillus plantarum against H₂O₂-induced oxidative stress in HUVEC cells

Guan WANG, Mingyue HAO, Qiong LIU, Yanlong JIANG, Haibin HUANG, Guilian YANG, Chunfeng WANG

DOI: 10.1631/jzus.B2000441 Downloaded: 2323 Clicked: 3824 Cited: 0 Commented: 0(p.348-365) <Full Text> <PPT> 1595

Chinese summary <24> 重組植物(wù)乳杆菌對H₂O₂誘導HUVEC細胞産生(shēng)氧化應激損傷的保護作用

目的：本文研究新功能重組植物(wù)乳杆菌NC8-pSIP409-alr-ACEIP保護血管内皮細胞損傷的初步作用機制。
創新點：成功構建非抗性篩選标記的新功能植物(wù)乳杆菌NC8-pSIP409-alr-ACEIP，其具有安全、方便、無毒副作用，且以食療方式達到降血壓的優點。研究NC8-pSIP409-alr-ACEIP對相關蛋白(bái)血管緊張素II（AngII）、血管緊張素轉化酶2（ACE2）、B淋巴細胞瘤-2（Bcl-2）、BCL2關聯X蛋白(bái)（Bax）與氧化應激相關因子的變化情況，爲闡明NC8-pSIP409-alr-ACEIP保護血管内皮細胞損傷的作用機制提供了基礎的理論依據。
方法：首次構建以雙基因标記的非抗性篩選錨定爲表達載體(tǐ)的新功能型植物(wù)乳杆菌（NC8-pSIP409-alr-ACEIP），使用不同濃度的過氧化氫（H₂O₂）誘導人臍靜脈内皮細胞（HUVEC）細胞，構建氧化應激損傷細胞模型（Hy-HUVEC），通過MTT、流式細胞術等方法檢測Hy-HUVEC的凋亡，通過蛋白(bái)質印迹法（western blot）檢測AngII、ACE2、誘導型一(yī)氧化氮合酶（iNOS）、尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶（gp91phox）、Bcl-2和Bax的蛋白(bái)表達情況，同時檢測氧化應激相應指标活性氧（ROS）、線粒體(tǐ)膜電位（MMP）、丙二醛（MDA）和超氧化物(wù)歧化酶（SOD）的變化情況。
結論：NC8-pSIP409-alr-ACEIP對H₂O₂誘導的HUVEC細胞氧化應激損傷具有保護作用，其作用機制與增強抗氧化能力和降低由線粒體(tǐ)凋亡通路引發的細胞凋亡有關。

關鍵詞組：氧化應激；細胞凋亡；人臍靜脈内皮細胞（HUVEC）；過氧化氫（H₂O₂）

Genome-wide analysis of microRNA156 and its targets, the genes encoding SQUAMOSA promoter-binding protein-like (SPL) transcription factors, in the grass family Poaceae

Erkui YUE, Hua TAO, Jianhong XU

DOI: 10.1631/jzus.B2000519 Downloaded: 1853 Clicked: 3301 Cited: 0 Commented: 0(p.366-382) <Full Text> <PPT> 1376

Chinese summary <22> 禾本科microRNA156及其靶基因SPL轉錄因子的全基因組分(fēn)析

目的：爲了探究microRNA156（miR156）及其靶基因SPL兩者在禾本科基因組中(zhōng)拷貝數以及它們在植物(wù)基因組中(zhōng)的進化選擇關系。
創新點：在5個已完成全基因組測序的禾本科作物(wù)中(zhōng)鑒定miR156及其靶基因SPL的拷貝數，利用比較基因組學和分(fēn)子進化方法并結合DNA甲基化組數據闡明miR156及其靶基因SPL的起源和進化機制。
方法：基于全基因測序序列鑒定SPL基因和MIR156基因及其成熟序列在基因組中(zhōng)的拷貝數，利用MEGA X軟件構建起進化樹(shù)；下(xià)載水稻不同組織中(zhōng)SPL和MIR156基因的轉錄組和DNA甲基化組數據，并根據軟件與程序檢測其表達量與DNA甲基化水平。
結論：MIR156和SPL具有不同的起源和進化機制，SPL似乎是由垂直進化産生(shēng)的，而MIR156似乎是對成熟序列的強烈進化選擇産生(shēng)的。

關鍵詞組：MicroRNA156；SPL基因；DNA甲基化；基因表達；禾本科基因組

Development of a pyrF-based counterselectable system for targeted gene deletion in Streptomyces rimosus

Yiying YANG, Qingqing SUN, Yang LIU, Hanzhi YIN, Wenping YANG, Yang WANG, Ying LIU, Yuxian LI, Shen PANG, Wenxi LIU, Qian ZHANG, Fang YUAN, Shiwen QIU, Jiong LI, Xuefeng WANG, Keqiang FAN, Weishan WANG, Zilong LI, Shouliang YIN

DOI: 10.1631/jzus.B2000606 Downloaded: 2226 Clicked: 3300 Cited: 0 Commented: 0(p.383-396) <Full Text> <PPT> 1568

Chinese summary <25> 基于pyrF作爲反選标記構建适用于龜裂鏈黴菌的基因敲除系統

目的：以pyrF作爲反選标記基因構建基因敲除系統，快速、高效敲除龜裂鏈黴菌的靶基因。
創新點：在鏈黴菌種屬内首次采用pyrF作爲反選标記基因，以5-氟乳清酸作爲篩選因子，實現靶基因的敲除。與傳統的敲除方法相比，該敲除系統獲得同源雙交換突變株的時間大(dà)大(dà)縮短。
方法：基于pyrF反選标記的基因敲除系統包括一(yī)個尿嘧啶營養缺陷型宿主（ΔpyrF）和一(yī)個攜帶互補基因pyrF的非自主複制型的敲除載體(tǐ)（pKC1132-pyrF）。第一(yī)步，将攜帶有互補基因pyrF的敲除質粒導入到尿嘧啶營養缺陷型宿主（ΔpyrF）中(zhōng)，隻有發生(shēng)單交換重組的突變株，才能在缺少尿嘧啶的基本培養基中(zhōng)生(shēng)長；第二步，将發生(shēng)單交換的突變株接種到含有5-氟乳清酸的基本培養基中(zhōng)，隻有發生(shēng)第二次同源重組，且被敲除的靶基因、pyrF基因及質粒骨架發生(shēng)重組丢失的突變株才能在含有5-氟乳清酸的培養基中(zhōng)生(shēng)長。經過兩步篩選，快速、高效實現靶基因的敲除。
結論：本文通過生(shēng)物(wù)信息學比對、基因敲除和回補實驗驗證pyrF基因爲乳清酸核苷-5’-磷酸脫羧酶的編碼基因。利用pyrF基因作爲反選标記，以5-氟乳清酸作爲篩選因子，快速、高效的實現了龜裂黴菌的靶基因otcR的敲除。本文構建的基因敲除系統爲鏈黴菌的分(fēn)子遺傳操作提供了一(yī)種新的遺傳工(gōng)具。

關鍵詞組：反選敲除系統；pyrF；5-氟乳清酸；基因敲除；龜裂鏈黴菌

Phenolic profile of jujube fruit subjected to gut microbiota fermentation and its antioxidant potential against ethyl carbamate-induced oxidative damage

Tao BAO, Ming ZHANG, Yuanqing ZHOU, Wei CHEN

DOI: 10.1631/jzus.B2000754 Downloaded: 1988 Clicked: 4076 Cited: 0 Commented: 0(p.397-409) <Full Text> <PPT> 1632

Chinese summary <22> 腸道菌群酵解對紅棗多酚及其保護氨基甲酸乙酯所緻氧化損傷的影響

目的：研究紅棗在腸道菌群酵解作用下(xià)的生(shēng)物(wù)活性物(wù)質組成和抗氧化功效，以及其對氨基甲酸乙酯誘導細胞毒性的保護作用，爲紅棗在腸道菌群酵解後發揮抗氧化作用提供新思路。
創新點：首次研究了腸道菌群酵解對紅棗中(zhōng)生(shēng)物(wù)活性物(wù)質組成和抗氧化能力的影響及其對氨基甲酸乙酯誘導細胞毒性的保護作用。
方法：紅棗模拟腸道菌群酵解（0~48 h）後，采用比色法和高效液相色譜法分(fēn)析黃酮、多酚、總糖和還原糖在發酵過程中(zhōng)的含量變化；采用體(tǐ)外(wài)抗氧化活性評價方法研究紅棗發酵代謝産物(wù)抗氧化活性；采用MTT法和Hoechst 33258熒光探針研究不同濃度（0.25、0.50、1.00和2.00 mg/mL）紅棗發酵48 h代謝産物(wù)對氨基甲酸乙酯誘導Caco-2細胞的細胞活力和DNA損傷的影響；分(fēn)别采用6-羧基-2’,7’-二氯二氫熒光素二乙酸酯（DCFH-DA）和萘-2,3-二甲醛（NDA）熒光探針檢測不同濃度（0.25、0.50和1.00 mg/mL）紅棗發酵48 h代謝産物(wù)對氨基甲酸乙酯誘導Caco-2細胞内活性氧（ROS）和谷胱甘肽（GSH）水平；采用RH123熒光探針檢測不同濃度（0.25、0.50和1.00 mg/mL）紅棗發酵48h代謝産物(wù)對氨基甲酸乙酯誘導Caco-2細胞内線粒體(tǐ)膜電位的影響。
結論：紅棗經腸道菌群酵解後含有豐富的生(shēng)物(wù)活性成分(fēn)，具有很強的抗氧化能力。紅棗發酵代謝物(wù)可抑制氨基甲酸乙酯誘導的Caco-2細胞活力下(xià)降和DNA損傷，減少細胞内ROS生(shēng)成，恢複GSH水平和線粒體(tǐ)膜電位，抑制氨基甲酸乙酯誘導的細胞氧化損傷。

關鍵詞組：紅棗；腸道菌群酵解；酚類物(wù)質；氨基甲酸乙酯；抗氧化活性

Osteogenic effects of antihypertensive drug benidipine on mouse MC3T3-E1 cells in vitro

Baixiang WANG, Jiakang YANG, Lijie FAN, Yu WANG, Chenqiu ZHANG, Huiming WANG

DOI: 10.1631/jzus.B2000628 Downloaded: 1784 Clicked: 3033 Cited: 0 Commented: 0(p.410-420) <Full Text> <PPT> 1367

Chinese summary <21> 降壓藥貝尼地平在體(tǐ)外(wài)對小(xiǎo)鼠MC3T3-E1細胞促成骨作用的初步研究

概要：高血壓在老年人群中(zhōng)多發，而不良骨質情況例如骨質疏松症也多見于老年患者。貝尼地平（Benidipine，BD）作爲廣泛使用的抗高血壓藥，被發現具有一(yī)定的改善骨代謝的作用。爲探究貝尼地平的促成骨作用，本實驗選用了小(xiǎo)鼠MC3T3-E1前成骨細胞進行體(tǐ)外(wài)實驗。MTT及細胞周期試驗顯示M3CT3-E1細胞增殖能力受BD影響顯著提升且具有濃度依賴性。堿性磷酸酶活力試驗、基質礦化試驗、成骨相關基因和蛋白(bái)表達的測定發現，BD可促進MC3T3-E1細胞的成骨向分(fēn)化和成熟。此外(wài)，本項研究結果顯示，BMP2/Smad通路在BD的促成骨效應中(zhōng)發揮作用，而OPG/RANKL/RANK通路的改變提示BD可能通過抑制破骨細胞的活動間接改善骨代謝。綜上，在進一(yī)步研發治療伴有不良骨質情況的高血壓患者的雙效藥物(wù)方面，BD具有廣闊的研究前景和應用潛力。

關鍵詞組：貝尼地平；成骨細胞；骨質疏松症；M3CT3-E1

Cornuside alleviates experimental autoimmune encephalomyelitis by inhibiting Th17 cell infiltration into the central nervous system

Rongbo ZHANG, Jin LIU, Bin XU, You WU, Shunli LIANG, Qiang YUAN

DOI: 10.1631/jzus.B2000771 Downloaded: 1709 Clicked: 2821 Cited: 0 Commented: 0(p.421-430) <Full Text> <PPT> 1331

Chinese summary <21> 山茱萸新苷通過抑制Th17細胞浸潤中(zhōng)樞神經系統緩解實驗性自身免疫性腦脊髓炎

目的：爲了明确山茱萸新苷對實驗性自身免疫性腦脊髓炎（EAE）的治療作用，以及對Th17和Treg細胞浸潤中(zhōng)樞神經系統（CNS）的影響。
創新點：本研究提示山茱萸新苷可以改善EAE大(dà)鼠的神經功能缺損症狀，減輕EAE大(dà)鼠炎症浸潤及脫髓鞘，并抑制Th17細胞浸潤。
方法：使用豚鼠脊髓勻漿乳劑皮下(xià)注射Lewis大(dà)鼠誘導EAE，每天進行神經功能評分(fēn)。待EAE大(dà)鼠開(kāi)始出現神經功能缺損症狀的第2天，4組大(dà)鼠（對照組、EAE組、EAE/山茱萸新苷組和EAE/潑尼松龍組）分(fēn)别接受生(shēng)理鹽水、生(shēng)理鹽水、山茱萸新苷（150 mg/kg）、潑尼松龍（5 mg/kg）治療，2周後停止治療。對大(dà)鼠脊髓進行HE和LFB染色，以及RORγ和Foxp3免疫組化染色，并通過流式細胞檢測血液中(zhōng)Th17和Treg細胞數量，用酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測血清中(zhōng)白(bái)介素17A（IL-17A）、IL-10、轉化生(shēng)長因子β（TGF-β）、IL-6、IL-23和IL-2水平。
結論：山茱萸新苷可以緩解EAE症狀，這可能通過抗炎抗免疫作用産生(shēng)，而Th17細胞可能是其發揮作用的靶标之一(yī)。因此，山茱萸新苷存在治療多發性硬化（MS）的潛在可能性。

關鍵詞組：山茱萸新苷；實驗性自身免疫性腦脊髓炎；多發性硬化；炎症