Journal of Zhejiang University

Current Issue: <JZUS-B>

Journal of Zhejiang University-SCIENCE B (Biomedicine & Biotechnology)

ISSNs 1673-1581 (Print); 1862-1783 (Online); CN 33-1356/Q; started in 2005,Monthly.

JZUS-B is an international "Biomedicine & Biotechnology" reviewed-Journal indexed by SCI-E, MEDLINE, PMC, BA, BIOSIS Previews, JST, ZR, CA, SA, AJ, ZM, CABI, CSA, etc., and supported by the National Natural Science Foundation of China. It mainly covers research in Biomedicine, Biochemistry and Biotechnology, etc.

Impact factor: 1.099 (2011), 1.108 (2012), 1.293 (2013), 1.278 (2014), 1.303 (2015), 1.676 (2016), 1.815 (2017), 1.879 (2018).

Journal of Zhejiang University SCIENCE B

ISSN 1673-1581(Print), 1862-1783(Online), Monthly

2015 Vol.16 No.4 P.253-328

<<< CONTENTS >>>

Articles

Synthetic promoters consisting of defined cis-acting elements link multiple signaling pathways to probenazole-inducible system

Zheng Zhu, Jiong Gao, Jin-xiao Yang, Xiao-yan Wang, Guo-dong Ren, Yu-long Ding, Ben-ke Kuai

DOI: 10.1631/jzus.B1400203 Downloaded: 3510 Clicked: 4866 Cited: 3 Commented: 0(p.253-263) <Full Text> <PPT> 1784

Chinese summary <28> 基于已知(zhī)順式元件的人工(gōng)啓動子響應性分(fēn)析揭示烯丙異噻唑誘導系統可觸發植物(wù)體(tǐ)内多條信号途徑

中(zhōng)文概要：
目的：構建有效響應烯丙異噻唑（PBZ）誘導的人工(gōng)合成啓動子，了解植物(wù)體(tǐ)内受PBZ誘導系統觸發的信号途徑。
創新點：通過分(fēn)析包含已知(zhī)順式元件的人工(gōng)合成啓動子對PBZ的響應性，爲構建一(yī)種基于PBZ誘導系統的新型化學誘導啓動子提供了可能性，并初步揭示了除水楊酸（SA）外(wài)，茉莉酸（JA）和乙烯等多條信号途徑可能共同參與了PBZ誘導的植物(wù)免疫反應過程。
方法：利用已知(zhī)的響應相關信号通路的順式作用元件構建人工(gōng)合成啓動子，融合GUS報告基因後，穩定轉化拟南(nán)芥。通過檢測PBZ處理過程中(zhōng)GUS酶活性的變化，了解人工(gōng)合成啓動子對PBZ的響應性，分(fēn)析PBZ誘導系統可能觸發的信号途徑。
結論：除了SA響應元件SARE可以有效響應PBZ誘導外(wài)，利用JA和乙烯響應元件JERE和GCC，超敏反應（HR）相關的順式元件HSRE和GST1，以及植物(wù)抗病反應中(zhōng)重要順式作用元件W-box構建的人工(gōng)合成啓動子也均可有效響應PBZ。另外(wài)，通過人工(gōng)合成啓動子響應性分(fēn)析的手段，初步揭示了包括SA、JA、乙烯、鈣離(lí)子和絲裂原活化蛋白(bái)激酶（MAPKs）在内的多條信号通路可能共同參與了PBZ誘導植物(wù)免疫反應的過程。

關鍵詞組：烯丙異噻唑；人工(gōng)合成啓動子；順式作用元件；化學誘導系統

Alternaria toxin-induced resistance in rose plants against rose aphid (Macrosiphum rosivorum): effect of tenuazonic acid

Fa-zhong Yang, Bin Yang, Bei-bei Li, Chun Xiao

DOI: 10.1631/jzus.B1400151 Downloaded: 2520 Clicked: 4762 Cited: 0 Commented: 0(p.264-274) <Full Text> <PPT> 1735

Chinese summary <28> 鏈格孢菌毒素能誘導中(zhōng)國月季産生(shēng)抗蚜活性的細交鏈孢菌酮酸

中(zhōng)文概要：
目的：研究鏈格孢菌毒素能誘導中(zhōng)國月季植株産生(shēng)對月季長管蚜的抗性，從而證實寄主植物(wù)介導的病蟲互作關系的存在，并研究其互作機制。
創新點：證實了一(yī)種對寄主植物(wù)和害蟲均無毒性的真菌毒素能使寄主植物(wù)産生(shēng)對昆蟲的誘導抗性。
方法：馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養基培養鏈格孢菌獲得毒素粗品，大(dà)孔樹(shù)脂純化後配制成不同濃度的溶液，噴施到中(zhōng)國月季植株上。處理結束後接種月季長管蚜，與對照相比，計算毒素處理對蚜蟲的抑制百分(fēn)數。用高效液相色譜法（HPLC）結合标準品分(fēn)析毒素中(zhōng)是否存在細交鏈孢菌酮酸（TeA），并測定其含量。TeA同法處理中(zhōng)國月季植株，測定TeA對蚜蟲的抑制率，并與毒素粗品比較。再通過HPLC法測定植物(wù)體(tǐ)表和體(tǐ)内殘留的TeA，以證明TeA能自然降解完全。
結論：（1）鏈格孢菌粗毒素和對照品TeA均能使中(zhōng)國月季植株産生(shēng)對月季長管蚜的系統誘導抗性，顯著降低月季長管蚜對中(zhōng)國月季的危害；（2）鏈格孢菌粗毒素中(zhōng)的主要抗蚜活性成分(fēn)是TeA，TeA有望成爲中(zhōng)國月季上具有抗蚜活性的先導化合物(wù)；（3）粗毒素和對照品TeA對蚜蟲和植物(wù)均無傷害作用，但能激活植物(wù)對蟲害的誘導抗性（ISR）和系統獲得性抗性（SAR），可直接證實二者間存在着寄主植物(wù)介導的間接的病蟲互作關系。

關鍵詞組：鏈格孢菌毒素；細交鏈孢菌酮酸；病蟲互作關系；高效液相色譜法（HPLC）；誘導抗性

Evaluation of yeasts from Tibetan fermented products as agents for biocontrol of blue mold of Nashi pear fruits

Hao Hu, Yang Xu, Huang-ping Lu, Rui Xiao, Xiao-dong Zheng, Ting Yu

DOI: 10.1631/jzus.B1400162 Downloaded: 2769 Clicked: 3989 Cited: 1 Commented: 0(p.275-285) <Full Text> <PPT> 1891

Chinese summary <23> 西藏發酵制品中(zhōng)拮抗酵母對水晶梨青黴病的防治效果研究

中(zhōng)文概要：
目的：從西藏發酵制品中(zhōng)分(fēn)離(lí)篩選出對水晶梨采後青黴病具有較好防治效果的拮抗酵母，并對其作用機理進行研究。
創新點：首次從西藏發酵制品中(zhōng)篩選得到一(yī)株對水晶梨采後青黴病具有較好防治效果的拮抗酵母Rhodotorula mucilaginosa，并對其作用機理進行了初步研究。
方法：采用水晶梨果實體(tǐ)内篩選的方法，經過初篩與複篩，确定具有較好生(shēng)防效果的拮抗酵母；通過對篩選所得拮抗酵母不同濃度、不同處理液的生(shēng)防效果，果實傷口處生(shēng)長動态，以及對梨果實采後品質影響的研究，初步探讨西藏發酵制品中(zhōng)拮抗酵母的生(shēng)防作用機理。
結論：從西藏發酵制品中(zhōng)篩選得到一(yī)株拮抗酵母R. mucilaginosa，其對水晶梨采後青黴病具有較好的生(shēng)物(wù)防治效果。研究結果發現其主要作用機理爲在果實傷口處與病原菌的營養與空間競争。通過進一(yī)步研究，可開(kāi)發爲梨果實采後病害防治的新型生(shēng)物(wù)保鮮劑。

關鍵詞組：生(shēng)物(wù)防治；采後；Rhodotorula mucilaginosa；西藏發酵制品；水晶梨

Mutation breeding of high 4-androstene-3,17-dione-producing Mycobacterium neoaurum ZADF-4 by atmospheric and room temperature plasma treatment

Chao Liu, Xian Zhang, Zhi-ming Rao, Ming-long Shao, Le-le Zhang, Dan Wu, Zheng-hong Xu, Hui Li

DOI: 10.1631/jzus.B1400274 Downloaded: 2427 Clicked: 4352 Cited: 5 Commented: 0(p.286-295) <Full Text> <PPT> 1840

Chinese summary <26> 采用常壓室溫等離(lí)子體(tǐ)誘變技術獲得一(yī)株高産雄甾-4-烯-3,17-二酮的突變菌株Mycobacterium neoauru ZADF-4

中(zhōng)文概要：
目的：獲得一(yī)株高産雄甾-4-烯-3,17-二酮（AD）的Mycobacterium neoaurum突變株。
創新點：獲得了一(yī)株3-甾酮-Δ¹-脫氫酶（KSDD）酶活缺陷型的高産AD的誘變菌株Mycobacterium neoaurum ZADF-4，并采用菌落顯色法篩選KSDD酶活缺陷型M. neoaurum突變株。
方法：（1）誘變方法：采用常壓室溫等離(lí)子體(tǐ)（ARTP）誘變技術來處理出發菌株M. neoaurum ZAD。ARTP誘變條件如下(xià)：功率40 W，氣流量 12.5 L/min，輻射距離(lí)1 cm，樣品體(tǐ)積10 µl，輻射時間爲60、90、120、150和180 s；緻死率統計優化後，最适輻射時間爲150 s，緻死率爲90%~96%。（2）篩選方法：将ARTP誘變處理後的菌株點種在硝酸纖維濾膜上，30 °C培養2 d，然後将長有菌落的濾膜小(xiǎo)心取出并漂浮在4 mg/ml 二氯靛酚（DCPIP）溶液（0.1 mmol/L 磷酸緩沖液pH 7.0），30 °C培養1 d直到全部菌落染成藍(lán)色。然後将該濾膜取出，漂浮在250 mmol/L AD溶液（2%甲醇和50 mmol/L Tris pH 7.0緩沖液），室溫放(fàng)置15 min左右，觀察菌落顔色變化。KSDD在底物(wù)AD存在時會脫氫産生(shēng)雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮（ADD）和H⁺，H⁺可以使被DCPIP染成藍(lán)色的菌株褪色。因此，酶活缺陷型的菌株會仍保持藍(lán)色，而酶活高的菌株會褪色爲黃色（圖3）。（3）對獲得的潛在的高産AD菌株進行進一(yī)步的酶活檢測以及産量驗證，以期獲得最優的突變株。
結論：獲得了4株具有潛在的高産AD能力的菌株，其中(zhōng)，最優的突變株ZADF-4的KSDD酶活相較于出發菌株ZAD下(xià)降了81.2%（圖4），活性膠也證明其KSDD酶活相較于出發菌株下(xià)降明顯（圖5）。薄層色譜法（TLC）和高效液相色譜法（HPLC）實驗證明突變株ZADF-4中(zhōng)，AD的産量有了明顯的提高（圖6和圖7），提高到了(6.28±0.11) g/L，AD/ADD提高到8:1，AD的摩爾産率達到60.3%（表1）。對出發菌株ZAD和突變株ZADF-4的ksdd基因進行克隆和序列比對，發現ZADF-4的ksdd序列在5'端缺失9個核苷酸（atgttctac），導緻3個氨基酸（MFY）的缺失；還發生(shēng)了兩個點突變，其中(zhōng)一(yī)個是無義突變（g.15a>6t），另一(yī)個是有義突變（g.413c>404t），并引起了相應位置上的氨基酸變化（p.138S>135L）。上述的基因突變及其引起的氨基酸序列的變化可能是引起M. neoaurum ZADF-4中(zhōng)KSDD酶活降低及AD産量提高的主要原因。

關鍵詞組：Mycobacterium neoaurum；常壓室溫等離(lí)子體(tǐ) （ARTP）；誘變育種；雄甾-4-烯-3,17-二酮（AD）；雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮（ADD）

Expression profiles of miRNAs in Gossypium raimondii

Jun Ma, Teng-long Guo, Qing-lian Wang, Kun-bo Wang, Run-run Sun, Bao-hong Zhang

DOI: 10.1631/jzus.B1400277 Downloaded: 2520 Clicked: 4393 Cited: 5 Commented: 0(p.296-303) <Full Text> <PPT> 1812

Chinese summary <27> MicroRNA 在雷蒙德氏棉中(zhōng)的表達

中(zhōng)文概要：
目的：探索16個保守microRNA在雷蒙德氏棉中(zhōng)的表達情況。
創新點：首次研究了microRNA在雷蒙德氏棉四個組織的表達情況。
方法：設計16個microRNA的引物(wù)，并提取雷蒙德氏棉四個不同組織的RNA進行實時熒光定量聚合酶鏈式反應（qRT-PCR）。
結論：在不同的組織中(zhōng)，這些microRNA 的表達水平差異很大(dà)。包括miR-159、miR-162、miR-164、miR-172、miR-390、miR-395、miR-397和miR-398在内的8個microRNA在花蕾中(zhōng)表達含量非常高，而另外(wài)一(yī)些microRNA，例如miR-166和miR-160，在四個不同組織中(zhōng)都有很高的表達量。

關鍵詞組：棉花；microRNA；表達譜；實時熒光定量聚合酶鏈式反應（qRT-PCR）；雷蒙德氏棉

Cassava stillage and its anaerobic fermentation liquid as external carbon sources in biological nutrient removal

Fan Bu, Xiang Hu, Li Xie, Qi Zhou

DOI: 10.1631/jzus.B1400106 Downloaded: 2574 Clicked: 4812 Cited: 4 Commented: 0(p.304-316) <Full Text> <PPT> 1844

Chinese summary <23> 木薯酒糟及其厭(yàn)氧發酵液作爲外(wài)加碳源強化城市生(shēng)活污水生(shēng)物(wù)營養鹽去(qù)除研究

中(zhōng)文概要：
目的：針對目前城市污水處理中(zhōng)普遍存在的進水碳源不足引起的脫氮除磷效率不高的問題，而大(dà)量具有很高碳氮比（C/N）和可生(shēng)物(wù)降解有機成分(fēn)的食品工(gōng)業廢水亟需處理的現狀，本文考察了木薯酒精廠廢水（木薯酒糟及其厭(yàn)氧發酵液）分(fēn)别作爲外(wài)加碳源資(zī)源化利用的可行性。
創新點：對比考察了木薯酒糟及其厭(yàn)氧發酵液分(fēn)别作爲碳源對活性污泥系統脫氮除磷的影響，爲處理低C/N比城市污水尋求廉價優質的外(wài)加碳源提供理論依據。
方法：通過運行三組平行的厭(yàn)氧/缺氧/好氧序批式活性污泥反應器（SBR），以乙酸鈉作爲對比，考察木薯酒糟及其厭(yàn)氧發酵液作爲碳源對活性污泥系統碳、氮、磷變化規律的影響，并通過硝酸鹽利用速率（NUR）和厭(yàn)氧-缺氧/好氧批次試驗對污泥特性進行分(fēn)析。
結論：（1）在整個試驗過程中(zhōng)，與乙酸鈉作爲碳源相比，木薯酒糟及其厭(yàn)氧發酵液在相同的運行條件下(xià)取得了更高的總氮（TN）去(qù)除率，分(fēn)别爲(72.4±3.2)%和(73.2±2.6)%，高于乙酸鈉的(62.6±3.5)%。NUR試驗結果表明，木薯酒糟及其厭(yàn)氧發酵液污泥的反硝化速率分(fēn)别爲5.49~5.99 g N/(kg MLVSS·h)和6.63~6.81 g N/(kg MLVSS·h)，與其他研究中(zhōng)報道的食品工(gōng)業廢水的反硝化速率相當或略高。（2）以木薯酒糟及其厭(yàn)氧發酵液作爲碳源的系統發生(shēng)了顯著的反硝化聚磷現象，兩體(tǐ)系中(zhōng)的反硝化聚磷菌分(fēn)别占總聚磷菌的62.6%（86天）和61.8%（65天）。（3）以木薯酒糟上清液及其厭(yàn)氧發酵液作爲碳源的生(shēng)物(wù)營養鹽去(qù)除（SBR）系統均取得了良好穩定的脫氮除磷效果。在BNR工(gōng)藝中(zhōng)投加木薯酒糟及其厭(yàn)氧堿性發酵液作爲外(wài)加碳源，不僅可以提高系統氮磷去(qù)除效果，還能解決這部分(fēn)廢水的處理問題，是一(yī)種很有潛力的替代碳源。

關鍵詞組：生(shēng)物(wù)營養鹽去(qù)除；外(wài)加碳源；反硝化；強化生(shēng)物(wù)除磷

Effect of culturing conditions on the expression of key enzymes in the proteolytic system of Lactobacillus bulgaricus

Jun-cai Hou, Fei Liu, Da-xi Ren, Wei-wei Han, Yue-ou Du

DOI: 10.1631/jzus.B1400230 Downloaded: 2101 Clicked: 3899 Cited: 1 Commented: 0(p.317-326) <Full Text> <PPT> 1644

Chinese summary <23> 培養條件對保加利亞乳杆菌蛋白(bái)水解體(tǐ)系關鍵酶基因表達的影響

中(zhōng)文概要：
目的：研究不同培養條件（不同生(shēng)長階段、初始pH值、培養溫度和氮源）對保加利亞乳杆菌蛋白(bái)水解體(tǐ)系關鍵蛋白(bái)酶基因表達的影響。
創新點：首次證明在脫脂乳中(zhōng)培養保加利亞乳杆菌可以顯著增加蛋白(bái)酶體(tǐ)系中(zhōng)關鍵酶基因表達，而在MRS培養基中(zhōng)，關鍵酶基因表達則顯著下(xià)調。
方法：應用實時熒光定量聚合酶鏈反應（qRT-PCR）技術，測定不同生(shēng)長階段的3株保加利亞乳杆菌（KLDS 08006、KLDS 08007和KLDS 08012）中(zhōng)7種關鍵酶基因表達的動态變化規律。
結論：研究發現保加利亞乳杆菌的初始pH值、氮源和培養階段影響關鍵酶基因的表達。穩定生(shēng)長期的7個蛋白(bái)酶基因表達比指數生(shēng)長期的表達平均下(xià)降30倍，其中(zhōng)KLDS 08006、KLDS 08007和KLDS 08012菌株的7個蛋白(bái)酶基因表達分(fēn)别下(xià)降62.5、15.0和59.0倍。菌株間的7個蛋白(bái)酶基因表達顯著不同。研究發現含有酪蛋白(bái)胨的MRS培養基抑制7個蛋白(bái)酶基因表達，其中(zhōng)對PepX基因表達影響最弱，而對OppD基因表達影響最強。

關鍵詞組：基因表達；蛋白(bái)水解體(tǐ)系；保加利亞乳杆菌；蛋白(bái)酶

Correspondence

Transcatheter aortic valve implantation for Chinese patients with bicuspid aortic valve

Yu-guo Weng

DOI: 10.1631/jzus.B1500063 Downloaded: 2089 Clicked: 4279 Cited: 0 Commented: 0(p.327-328) <Full Text>